科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中,含P基因的 DNA片段以及Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖所示,其中強(qiáng)啟動子能驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。請回答下列問題。
(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時,應(yīng)優(yōu)先選用的限制酶是 BamHⅠBamHⅠ和 SacⅠSacⅠ,這樣操作不僅使P基因在玉米植株中超量表達(dá),還可利用T-DNA的 可轉(zhuǎn)移可轉(zhuǎn)移特性,最終使P基因 整合到玉米細(xì)胞染色體上整合到玉米細(xì)胞染色體上。
(2)將農(nóng)桿菌液浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時,培養(yǎng)基中需加入 潮霉素潮霉素,篩選出的愈傷組織經(jīng)再分化過程形成叢芽,最終獲得轉(zhuǎn)基因玉米植株。
(3)對轉(zhuǎn)基因再生玉米植株進(jìn)行鑒定時發(fā)現(xiàn),有些植株雖有P基因,但幾乎沒有P蛋白,造成該現(xiàn)象的原因可能有 基因轉(zhuǎn)化過程中強(qiáng)啟動子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)基因轉(zhuǎn)化過程中強(qiáng)啟動子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)。
【考點】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】BamHⅠ;SacⅠ;可轉(zhuǎn)移;整合到玉米細(xì)胞染色體上;潮霉素;基因轉(zhuǎn)化過程中強(qiáng)啟動子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)
【解答】
【點評】
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