科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高.圖一是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖,圖二為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜.魚的抗凍蛋白基因不含圖中限制酶識別序列,Ampr為抗氨芐青霉素基因,其中①-④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟,Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細胞.請據(jù)圖作答:
(1)為了在番茄中獲得抗凍蛋白必須將抗凍蛋白基因連接在質(zhì)粒中的啟動子啟動子之后.圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的脫分化、再分化脫分化、再分化過程.
(2)在構(gòu)建基因表達載體時,可用一種或者多種限制酶進行切割.在此實例中,應該選用NdeⅠ、BamHⅠNdeⅠ、BamHⅠ限制酶切割.
(3)要利用培養(yǎng)基篩選出已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞,應使基因表達載體Ⅰ中含有抗氨芐青霉素基因(Ampr)抗氨芐青霉素基因(Ampr)作為標記基因.
(4)研究人員通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍法等)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍法等)法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi).
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】啟動子;脫分化、再分化;NdeⅠ、BamHⅠ;抗氨芐青霉素基因(Ampr);農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍法等)
【解答】
【點評】
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