胡蘿卜素脫飽和酶參與β-胡蘿卜素的合成。科學家將胡蘿卜素脫飽和酶基因(crtI基因)轉入水稻愈傷組織細胞,經(jīng)培育、篩選出胚乳細胞含有β-胡蘿卜素的“黃金大米”?;卮鹣铝袉栴}:
(1)獲取目的基因crtI是培育“黃金大米”的首要任務,從胡蘿卜細胞內提取mRNA,將mRNA經(jīng) 反轉錄反轉錄過程獲得DNA片段,再經(jīng) PCRPCR技術擴增可獲得大量的crtI基因。該方法獲得的crtI基因 不含有不含有(填“含有”或“不含有”)內含子和啟動子。
(2)將crtI基因構建成基因表達載體時需要用到 限制性核酸內切酶(限制酶)和DNA連接限制性核酸內切酶(限制酶)和DNA連接酶,crtI基因需要插入到質粒的 啟動子和終止子啟動子和終止子之間才能在受體細胞中表達。
(3)將crtI基因導入水稻愈傷組織細胞時,通常不采用農(nóng)桿菌轉化法,而是采用基因槍法或花粉管通道法,原因是 農(nóng)桿菌轉化法適用于雙子葉植物和裸子植物,而水稻是單子葉植物農(nóng)桿菌轉化法適用于雙子葉植物和裸子植物,而水稻是單子葉植物。
(4)檢測水稻植株中crtI基因是否成功表達出胡蘿卜素脫飽和酶可采用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交的方法,也可以通過觀察水稻胚乳的顏色判斷是否含有 β-胡蘿卜素β-胡蘿卜素。
【答案】反轉錄;PCR;不含有;限制性核酸內切酶(限制酶)和DNA連接;啟動子和終止子;農(nóng)桿菌轉化法適用于雙子葉植物和裸子植物,而水稻是單子葉植物;抗原—抗體雜交;β-胡蘿卜素
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:1難度:0.7
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