奶酪是一種常見的食品，傳統的方法是從未斷奶的小牛的胃黏膜里提取牛凝乳酶，它能水解多肽鏈中苯丙氨酸和甲硫氨酸之間的肽鍵以促使牛奶凝結來生產奶酪，此方法產量低且昂貴。如今科學家將編碼牛凝乳酶的基因導入大腸桿菌中，實現牛凝乳酶的批量生產，極大的滿足了奶酪生產的需求。請回答相關問題：
（1）科學家利用基因工程生產出大量的牛凝乳酶，該工程是在（DNA）分子（DNA）分子水平上進行設計和施工的，其核心步驟是基因表達載體的構建基因表達載體的構建。
（2）使大腸桿菌產生牛凝乳酶的目的基因最好從cDNA文庫cDNA文庫（cDNA文庫/基因組文庫）中獲取，原因是大腸桿菌是原核生物，cDNA文庫中沒有內含子，基因結構與原核細胞的基因結構更接近大腸桿菌是原核生物，cDNA文庫中沒有內含子，基因結構與原核細胞的基因結構更接近。
（3）利用圖示目的基因和質粒構建重組質粒，最好選用NcoI和XhoINcoI和XhoI（填限制性核酸內切酶名稱）切割，理由是目的基因不會被破壞、防止目的基因或載體自身的黏性末端連接、防止目的基因與載體反向連接目的基因不會被破壞、防止目的基因或載體自身的黏性末端連接、防止目的基因與載體反向連接。若要初步篩選出導入重組質粒的大腸桿菌，要在含氨芐青霉素氨芐青霉素（氨芐青霉素/四環(huán)素）的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。
（4）最后進行凝乳酶活性檢測：將適量的大腸桿菌表達出的凝乳酶的提取物加入脫脂奶粉溶液中，37℃保溫一段時間，可觀察到脫脂奶粉溶液有明顯的凝結脫脂奶粉溶液有明顯的凝結現象。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】（DNA）分子；基因表達載體的構建；cDNA文庫；大腸桿菌是原核生物，cDNA文庫中沒有內含子，基因結構與原核細胞的基因結構更接近；NcoI和XhoI；目的基因不會被破壞、防止目的基因或載體自身的黏性末端連接、防止目的基因與載體反向連接；氨芐青霉素；脫脂奶粉溶液有明顯的凝結
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：60引用：6難度：0.7
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