M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)，現(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）

，這類酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的

磷酸二酯

磷酸二酯

鍵斷開，重組質(zhì)粒導(dǎo)入成纖維細(xì)胞的過程稱為

轉(zhuǎn)化

轉(zhuǎn)化

。
（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要

定期更換培養(yǎng)液

定期更換培養(yǎng)液

，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。
（3）與體細(xì)胞核移植技術(shù)相比，胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更高，原因是

胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易

胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易

。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為

細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯

細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯

，功能上具有

發(fā)育的全能性

發(fā)育的全能性

。
（4）克隆動(dòng)物A與為其提供核和去核卵母細(xì)胞的雙親的性狀不完全相同的原因是

克隆動(dòng)物A細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自提供核的個(gè)體，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自去核卵母細(xì)胞的個(gè)體

克隆動(dòng)物A細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自提供核的個(gè)體，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自去核卵母細(xì)胞的個(gè)體

。