GFP是水母體內(nèi)存在的能發(fā)綠色熒光的一種蛋白??蒲腥藛T以GFP基因?yàn)椴牧希没蚬こ碳夹g(shù)獲得了能發(fā)其他顏色熒光的蛋白,豐富了熒光蛋白的顏色種類。
(1)構(gòu)建目的基因表達(dá)載體??蒲腥藛T從構(gòu)建的GFP突變基因文庫(kù)中提取目的基因(均為突變基因)構(gòu)建表達(dá)載體,其模式圖如圖所示(箭頭為GFP突變基因的轉(zhuǎn)錄方向)。圖中①為 終止子終止子,②為 啟動(dòng)子啟動(dòng)子,其作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄;圖中氨芐青霉素抗性基因是一種標(biāo)記基因,其作用是 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。
(2)目的基因的表達(dá)??蒲腥藛T將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá),發(fā)現(xiàn)大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光,有的發(fā)黃色熒光,有的不發(fā)熒光。請(qǐng)從密碼子特點(diǎn)的角度分析,發(fā)綠色熒光的可能原因是 密碼子具有簡(jiǎn)并性密碼子具有簡(jiǎn)并性(答出1點(diǎn)即可)。
(3)新蛋白與突變基因的關(guān)聯(lián)性分析。將上述發(fā)黃色熒光的大腸桿菌分離純化后,對(duì)其所含的GFP突變基因進(jìn)行測(cè)序,發(fā)現(xiàn)其堿基序列與GFP基因的不同,將該GFP突變基因命名為YFP基因(黃色熒光蛋白基因)。若要通過(guò)基因工程的方法探究YFP基因能否在真核細(xì)胞中表達(dá),實(shí)驗(yàn)思路是 將構(gòu)建好的表達(dá)載體(含有目的基因YFP基因)導(dǎo)入酵母菌中進(jìn)行表達(dá)將構(gòu)建好的表達(dá)載體(含有目的基因YFP基因)導(dǎo)入酵母菌中進(jìn)行表達(dá)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】終止子;啟動(dòng)子;RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄;鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái);密碼子具有簡(jiǎn)并性;將構(gòu)建好的表達(dá)載體(含有目的基因YFP基因)導(dǎo)入酵母菌中進(jìn)行表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/30 8:0:9組卷:5引用:2難度:0.6
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