如圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過程,請分析回答問題:
(1)為獲取抗鹽基因,可以從堿蓬細(xì)胞研磨液中提取抗鹽基因的mRNAmRNA來合成cDNA。利用PCR技術(shù)可在體外獲得大量抗鹽基因,該技術(shù)需要有一段已知抗鹽基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物引物;在采用常規(guī)PCR擴(kuò)增目的基因過程中、使用的DNA聚合酶不同一般生物體內(nèi)聚合酶,其最主要特點(diǎn)是耐高溫耐高溫。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時,為了防止含目的基因的外源DNA片段和質(zhì)粒自身環(huán)化,最好選用圖中限制酶
EcoRIEcoRI和HindIIIHindIII對它們進(jìn)行切割,不能使用SmaI切割的原因是SmaI會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因SmaI會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒時,還要在抗鹽基因前面加上啟動子啟動子。構(gòu)建因表達(dá)載體時,應(yīng)將目的基因插入到農(nóng)桿菌粒Ti質(zhì)粒的T-DNAT-DNA上,其原因是T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNAT-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】mRNA;引物;耐高溫;EcoRI;HindIII;SmaI會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因;啟動子;T-DNA;T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:19引用:1難度:0.7
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