草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝而導(dǎo)致植物死亡。我國科學(xué)家從草甘膦施用土壤中的微生物體內(nèi)獲取草甘膦抗性基因GR29，并將其導(dǎo)入大豆體細(xì)胞中獲得轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆，如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）圖中的GR29基因稱為

目的基因

目的基因

，通過PCR技術(shù)可在總DNA中專一性的擴增出GR29基因，原因是

PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結(jié)合

PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結(jié)合

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（2）圖中將GR29基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，原因是農(nóng)桿菌能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA分子轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞并整合到宿主細(xì)胞的

染色體DNA

染色體DNA

上。構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒中除圖示元件外，還必須具有啟動子和終止子，其中啟動子的作用是

啟動子是RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位，它能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

啟動子是RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位，它能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

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（3）圖中的兩次篩選中，其中“篩選1”中，需在農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基中添加

四環(huán)素

四環(huán)素

，才能篩選出含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。在“篩選2”中，為檢測GR29基因能否翻譯出相應(yīng)蛋白可采用的方法是

抗原—抗體雜交技術(shù)

抗原—抗體雜交技術(shù)

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（4）為獲得草甘膦抗性更強的轉(zhuǎn)基因大豆，請嘗試對上述轉(zhuǎn)基因大豆培育過程進(jìn)行改進(jìn)，寫出你的改進(jìn)措施：

用添加草甘膦的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，并可逐步增加濃度

用添加草甘膦的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，并可逐步增加濃度

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