某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Tet^r表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連續(xù)反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因，含有質(zhì)粒載體，含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有

能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因

能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因

（答出兩點(diǎn)即可）。而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

和

終止子

終止子

。
（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是

二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長

二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長

；并且載體和重組質(zhì)粒的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是

二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長

二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長

。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有

四環(huán)素

四環(huán)素

的固體培養(yǎng)基。