利用轉(zhuǎn)基因植物研制、生產(chǎn)疫苗,不但可以改變傳統(tǒng)的疫苗生產(chǎn)方式和接種手段,而且會大大降低疫苗的生產(chǎn)成本。以胡蘿卜無菌幼苗的子葉和下胚軸為外植體,通過攜帶有35S啟動子驅(qū)動的肺結(jié)核桿菌分泌蛋白MPT64基因的根癌土壤桿菌LBA4404的介導,將肺結(jié)核桿菌MPT64基因成功導入胡蘿卜細胞,獲得能表達肺結(jié)核疫苗(MPT64蛋白)的轉(zhuǎn)基因胡蘿卜。回答下列問題:
(1)從免疫學的角度分析,結(jié)核桿菌MPT64蛋白屬于 抗原抗原;從基因工程技術(shù)看,肺結(jié)核桿菌MPT64基因?qū)儆?目的基因目的基因。
(2)為獲取MPT64基因,可從肺結(jié)核桿菌的細胞中提取對應(yīng)mRNA,在 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段,再用 DNA連接DNA連接酶將35S啟動子拼接到cDNA片段的首端,能保證MPT64基因在胡蘿卜細胞的細胞核中能高效 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄。
(3)通常采用PCR技術(shù)擴增MPT64基因,擴增過程要在 PCR儀PCR儀(儀器)中進行,鑒定PCR產(chǎn)物常采用的方法是 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳;設(shè)計引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一,如圖為設(shè)計的兩種引物與MPT64基因的兩條鏈結(jié)合部位示意圖,箭頭表示子鏈的延伸方向是從 子鏈的5'端往3'端(或5'→3')子鏈的5'端往3'端(或5'→3')延伸。
(4)轉(zhuǎn)基因胡蘿卜細胞經(jīng)過 脫分化脫分化過程形成愈傷組織;愈傷組織能再分化成芽和根等,培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的 濃度、用量的比例濃度、用量的比例可影響愈傷組織的形成和分化。
【答案】抗原;目的基因;逆轉(zhuǎn)錄;DNA連接;轉(zhuǎn)錄;PCR儀;瓊脂糖凝膠電泳;子鏈的5'端往3'端(或5'→3');脫分化;濃度、用量的比例
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:4引用:1難度:0.7
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發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:39引用:10難度:0.5
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