許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因，其編碼的產(chǎn)物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽氖荏w細(xì)胞中篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過程如圖所示。請據(jù)圖回答：
（1）基因工程中，基因表達(dá)載體的組成包括復(fù)制原點、啟動子、終止子、標(biāo)記基因標(biāo)記基因、目的基因目的基因。
（2）限制酶EcoRI的識別序列和切割位點-G↓AATTC-，SmaⅠ的識別序列和切割位點-CCC↓GGG-，圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是 -TTAA-TTAA，連接過程中需要的基本工具是 DNA連接酶DNA連接酶。
（3）轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+處理，使其處于能吸收周圍 DNADNA的狀態(tài)。
（4）菌落顏色為白色的是 菌落③菌落③，原因是 lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出β-半乳糖苷酶lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出β-半乳糖苷酶。
（5）檢測菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的方法是 抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】標(biāo)記基因；目的基因；-TTAA；DNA連接酶；DNA；菌落③；lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出β-半乳糖苷酶；抗原一抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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