白細(xì)胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細(xì)胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細(xì)胞介素的過程。（tsr為一種抗生素-硫鏈絲菌素的抗性基因）
（1）提取人的白細(xì)胞介素基因適宜選用的限制酶是PstⅠ和HindⅢPstⅠ和HindⅢ，不能使用限制酶SmaⅠ的原因是限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂。
（2）除圖示方法外，也可從利用反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，需提供Taq酶和引物引物等。
（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細(xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的T-DNAT-DNA。
（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細(xì)胞，需要在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素硫鏈絲菌素。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達(dá)，可通過抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法進(jìn)行分子水平的檢測。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PstⅠ和HindⅢ；限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂；反轉(zhuǎn)錄；引物；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；T-DNA；硫鏈絲菌素；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：14引用：2難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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