番茄是重要的蔬菜和水果,CMV 病毒常使番茄生產遭受重大損失,由于傳統(tǒng)育種在番茄抗病毒病方面往往難以奏效,所以人們開展了大量番茄抗病毒病的基因工程研究,如圖1圖2表示含抗 CMV基因的 DNA片段和質粒,請回答下列問題。
(1)若要用 PCR 技術特異性地拷貝“抗 CMV 基因“,該過程遵循的原則是堿基互補配對原則堿基互補配對原則,需要加入的原料是 dATP、dTTP、dCTPdCTP和 dGTP,酶是耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶,一個目的基因經過 3次循環(huán)需要消耗引物1414個。
(2)據(jù)圖1分析構建所需要的基因表達載體需要選用限制酶Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ分別對目的基因和質粒進行切割,原因是用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割不僅能夠使目的基因插入到T-DNA片段中,還可以防止質粒和目的基因自身環(huán)化或反向連接現(xiàn)象發(fā)生用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割不僅能夠使目的基因插入到T-DNA片段中,還可以防止質粒和目的基因自身環(huán)化或反向連接現(xiàn)象發(fā)生。
(3)據(jù)圖2分析,篩選含有重組質粒的受體細胞首先需要在含四環(huán)素或卡那霉素四環(huán)素或卡那霉素(填“四環(huán)素“、“卡那霉素“或“四環(huán)素或卡那霉素“)的培養(yǎng)基上進行,植物基因工程中將目的基因導入受體細胞除了農桿菌轉化法之外,還可采取基因槍法、花粉管通道法基因槍法、花粉管通道法(答出1種即可),要確認抗病毒番茄是否培育成功,從個體水平進行檢測,要對培育出的番茄做病毒接種病毒接種實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】堿基互補配對原則;dCTP;耐高溫的DNA聚合酶;14;Ⅰ和Ⅱ;用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割不僅能夠使目的基因插入到T-DNA片段中,還可以防止質粒和目的基因自身環(huán)化或反向連接現(xiàn)象發(fā)生;四環(huán)素或卡那霉素;基因槍法、花粉管通道法;病毒接種
【解答】
【點評】
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