科學(xué)技術(shù)是把“雙刃劍”，給我們的生活帶來(lái)便利的同時(shí)，也帶來(lái)了一些隱藏的危機(jī)?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）“外源基因清除”技術(shù)能在一定程度上解決外源基因擴(kuò)散引起的一系列不利影響。該技術(shù)是將“外源基因清除”調(diào)控組件與基因表達(dá)載體的必備組件重組后構(gòu)建出新的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中表達(dá)，待外源基因完成相應(yīng)的功能后，“外源基因清除”調(diào)控組件將全部外源基因從花粉、種子和果實(shí)等特定器官中徹底清除?！巴庠椿蚯宄闭{(diào)控組件由“特定器官特異啟動(dòng)子、重組酶（FLP）基因和融合識(shí)別位點(diǎn)（LF）”構(gòu)成，LF是利用噬菌體的Cre/LoxP系統(tǒng)和酵母的FLP/FRT系統(tǒng)創(chuàng)造出的融合識(shí)別位點(diǎn)。FLP基因在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間和空間表達(dá)后，F(xiàn)LP可識(shí)別融合識(shí)別位點(diǎn)LF并在L與F之間完成切割，從而將兩個(gè)融合識(shí)別位點(diǎn)之間的序列在特定時(shí)期從特定植物器官的細(xì)胞基因組中全部清除。其技術(shù)原理如圖1所示：

清除不同器官中的外源基因時(shí)需要插入不同的特異啟動(dòng)子，原因是

特定基因只能在特定器官中表達(dá)或基因的表達(dá)具有選擇性

特定基因只能在特定器官中表達(dá)或基因的表達(dá)具有選擇性

。圖示的重組酶發(fā)揮清除作用后剩余的序列組合是

L-F-植物基因組

L-F-植物基因組

（用圖中的各序列名稱和短線表示）。
（2）據(jù)報(bào)道，接受豬心臟移植的美國(guó)人僅僅存活兩個(gè)月時(shí)間便死亡。這主要是因?yàn)樨i體內(nèi)的GGTA1基因表達(dá)引發(fā)人體發(fā)生急性排斥反應(yīng)造成的。以下是科學(xué)家獲得無(wú)免疫排斥的克隆豬心臟的過(guò)程，正確的操作順序是

⑤④②①③⑥

⑤④②①③⑥

（填序號(hào)）。
①早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)
②動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)
③胚胎移植技術(shù)
④利用基因編輯技術(shù)敲除體細(xì)胞中GGTA1基因
⑤測(cè)定GGTA1基因的堿基序列
⑥手術(shù)獲取無(wú)免疫排斥的克隆豬心臟
（3）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可用于豬體內(nèi)的GGTA1基因敲除。該系統(tǒng)主要包含單鏈向?qū)NA和Cas9蛋白兩個(gè)部分，向?qū)NA能特異性識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯，具體過(guò)程如圖2所示。對(duì)豬體內(nèi)的GGTA1基因進(jìn)行敲除，首先要根據(jù)合成

GGTA1基因的堿基序列

GGTA1基因的堿基序列

向?qū)NA。但是更多的學(xué)者認(rèn)為CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成“脫靶”的現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)向?qū)NA的序列長(zhǎng)短會(huì)影響基因敲除的成功率，向?qū)NA越短脫靶率越

高

高

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向?qū)NA過(guò)短，其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA與非目標(biāo)基因區(qū)段結(jié)合而脫靶

向?qū)NA過(guò)短，其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA與非目標(biāo)基因區(qū)段結(jié)合而脫靶

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