試卷征集
加入會員
操作視頻

檢測淋巴細胞的增殖能力是評價機體細胞免疫功能的重要指標之一。MTT 法是利用活細胞代謝產(chǎn)生的琥珀酸脫氫酶將 MTT 還原成不溶于水的藍紫色結(jié)晶,測量該結(jié)晶的吸光值可反映細胞的增殖情況。為探究不同細胞濃度對細胞增殖能力的影響,請用下列實驗器材完成實驗設(shè)計并討論分析:
材料器具:大鼠外周血淋巴細胞(濃度為 107 個/ml),細胞培養(yǎng)瓶若干,CO2 培養(yǎng)箱,比色計,基礎(chǔ)培養(yǎng)基,血細胞計數(shù)板。
(要求與說明:實驗檢測指標為(1)△OD=實驗組 OD-對照組 OD;(2)單位細胞(107)增殖力(CCP)=△OD×107/細胞數(shù);(3)培養(yǎng)過程中細胞始終保持增殖能力,培養(yǎng) 48 小時后測量上述各指標。)
(1)實驗思路:
①將大鼠外周血淋巴細胞分別稀釋配制成濃度為0.75×106、1.0×106、1.25×106、2×106、6×106的懸液;②取細胞培養(yǎng)瓶,隨機均分為7組,編號A-G,每組若干個。A-F組中加入適量且等量基礎(chǔ)培養(yǎng)基和等量不同濃度的淋巴細胞懸液,G組中加入與各組總體積相等的基礎(chǔ)培養(yǎng)基;③各組培養(yǎng)瓶置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時后,用比色計測量各組的OD值,用血細胞計數(shù)板計數(shù)培養(yǎng)后的細胞數(shù),并計算各組的△OD和CCP;④統(tǒng)計分析所得數(shù)據(jù)。
①將大鼠外周血淋巴細胞分別稀釋配制成濃度為0.75×106、1.0×106、1.25×106、2×106、6×106的懸液;②取細胞培養(yǎng)瓶,隨機均分為7組,編號A-G,每組若干個。A-F組中加入適量且等量基礎(chǔ)培養(yǎng)基和等量不同濃度的淋巴細胞懸液,G組中加入與各組總體積相等的基礎(chǔ)培養(yǎng)基;③各組培養(yǎng)瓶置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時后,用比色計測量各組的OD值,用血細胞計數(shù)板計數(shù)培養(yǎng)后的細胞數(shù),并計算各組的△OD和CCP;④統(tǒng)計分析所得數(shù)據(jù)。
。
(2)根據(jù)下表的實驗結(jié)果,繪制坐標曲線圖(X 軸刻度之間的實際距離不要求)
細胞濃度(個/ml) 0.75×106 1.0×106 1.25×106 2×106 6×106 10.0×106
△OD 0.005 0.020 0.045 0.035 0.040 0.040
CCP 2 5 9 8 9 9
(3)討論:
①△OD、CCP 值并未隨著細胞濃度增大而持續(xù)變大,可能的原因是
細胞密度過大可能引起接觸抑制及營養(yǎng)物質(zhì)過度消耗,抑制細胞增殖
細胞密度過大可能引起接觸抑制及營養(yǎng)物質(zhì)過度消耗,抑制細胞增殖
。
②MTT 法除了能檢測細胞的增殖情況,還能用于檢測細胞的
死活(或存活情況)、細胞的代謝強度(或細胞的活力)
死活(或存活情況)、細胞的代謝強度(或細胞的活力)
(填兩種)。

【答案】①將大鼠外周血淋巴細胞分別稀釋配制成濃度為0.75×106、1.0×106、1.25×106、2×106、6×106的懸液;②取細胞培養(yǎng)瓶,隨機均分為7組,編號A-G,每組若干個。A-F組中加入適量且等量基礎(chǔ)培養(yǎng)基和等量不同濃度的淋巴細胞懸液,G組中加入與各組總體積相等的基礎(chǔ)培養(yǎng)基;③各組培養(yǎng)瓶置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時后,用比色計測量各組的OD值,用血細胞計數(shù)板計數(shù)培養(yǎng)后的細胞數(shù),并計算各組的△OD和CCP;④統(tǒng)計分析所得數(shù)據(jù)。;細胞密度過大可能引起接觸抑制及營養(yǎng)物質(zhì)過度消耗,抑制細胞增殖;死活(或存活情況)、細胞的代謝強度(或細胞的活力)
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細胞工程的基本技術(shù),下列關(guān)于這兩項技術(shù)的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:29引用:2難度:0.7
  • 2.回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關(guān)的問題:
    (1)幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力。在進行基因工程操作時,可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     
    。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    (2)為了提高動物成纖維細胞克隆形成率,可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以
     
    支持生長等措施。當?shù)谝粋€卡氏瓶中的細胞濃度不再增加時,若要細胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是
     
    。細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是
     
    。
    (3)下列關(guān)于胚胎工程的敘述,錯誤的是
     

    A.在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
    B.若在囊胚期進行胚胎分割,內(nèi)細胞團均等分割,滋養(yǎng)成則不必
    C.可以從雌性動物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液,取出卵母細胞進一步培養(yǎng)成熟
    D.胚胎成纖維細胞可以用于胚胎干細胞的培養(yǎng),因為其能分泌抑制細胞分化的物質(zhì)。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:3引用:1難度:0.7
  • 3.據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù),2021年全球約5.37億成人患有糖尿病,670萬成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案,請回答下列問題:

    (1)從患者體內(nèi)獲得體細胞后,對其進行的初次培養(yǎng)稱為
     
    ,培養(yǎng)的細胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂,這種現(xiàn)象稱為
     
    。一般來說,動物細胞培養(yǎng)需要的條件有
     
    (少答出兩點)。
    (2)利用PCR技術(shù)擴增正常胰島素基因的前提條件是
     
    。目前臨床用的胰島素生效較慢,科學(xué)家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序,成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素,需要對
     
    進行定向改造。
    A.胰島素
    B.胰島素mRNA
    C.胰島素基因
    D.胰島
    (3)欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能,可設(shè)計如下實驗:將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的
     
    培養(yǎng)液中,適宜且相同條件下進行培養(yǎng),一段時間后分別檢測兩組培養(yǎng)液中
     
    。
    (4)該治療糖尿病的方法與異體移植相比,突出的優(yōu)點是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/31 2:30:2組卷:35引用:2難度:0.6
APP開發(fā)者:深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司| 應(yīng)用名稱:菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本:5.0.7 |隱私協(xié)議|第三方SDK|用戶服務(wù)條款
本網(wǎng)部分資源來源于會員上傳,除本網(wǎng)組織的資源外,版權(quán)歸原作者所有,如有侵犯版權(quán),請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù),本網(wǎng)將在三個工作日內(nèi)改正