安莎霉素是一類主要來源于海洋的稀有放線菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，具有較高的抗菌活性和藥用價值?？蒲腥藛T為鑒定產(chǎn)安莎霉素的放線菌與其他菌種的親緣關(guān)系，利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增該種放線菌DNA上的16SrRNA保守片段，然后通過DNA序列比對確定菌種親緣關(guān)系。查找數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)該放線菌的16SrRNA目的基因片段及相應(yīng)限制酶識別序列如圖、表所示。
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | HindⅢ | SacⅠ |
| 識別序列和切割位點(diǎn) | G↓AATTCG | G↓GATCC | A↓ AGCTT | GAGCT↓C |
不能互補(bǔ)配對
不能互補(bǔ)配對
。PCR擴(kuò)增目的基因需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，除需提供引物、目的基因作為模板外，還需提供
熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）、4種脫氧核苷酸
熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）、4種脫氧核苷酸
（答兩點(diǎn)）；PCR技術(shù)通過控制 溫度
溫度
來控制雙鏈的解聚與結(jié)合。（2）表中四種限制酶切割產(chǎn)生的末端稱為
黏性末端
黏性末端
；為了獲得16SrRNA目的基因片段，應(yīng)使用表中的限制酶是 EcoRⅠ、SacⅠ
EcoRⅠ、SacⅠ
。采用對比DNA序列的方法確定親緣關(guān)系的依據(jù)是 DNA分子堿基序列的相似度越高，親緣關(guān)系越近
DNA分子堿基序列的相似度越高，親緣關(guān)系越近
。（3）在基因工程中，PCR還可用于鑒定目的基因轉(zhuǎn)化是否成功，此過程需要設(shè)計(jì)嚴(yán)格與目的基因互補(bǔ)的引物序列，這樣做的目的是
不僅可快速獲得插入片段，而且可直接進(jìn)行DNA序列分析，從而獲得插入片段是否正確的最終結(jié)果
不僅可快速獲得插入片段，而且可直接進(jìn)行DNA序列分析，從而獲得插入片段是否正確的最終結(jié)果
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】不能互補(bǔ)配對；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）、4種脫氧核苷酸；溫度；黏性末端；EcoRⅠ、SacⅠ；DNA分子堿基序列的相似度越高，親緣關(guān)系越近；不僅可快速獲得插入片段，而且可直接進(jìn)行DNA序列分析，從而獲得插入片段是否正確的最終結(jié)果
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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