2020年8月16日,由我國(guó)軍事醫(yī)學(xué)研究院陳薇院士團(tuán)隊(duì)及康希諾生物聯(lián)合申報(bào)的腺病毒載體新冠疫苗被授予專(zhuān)利權(quán),是我國(guó)首個(gè)新冠疫苗專(zhuān)利。全面接種新冠疫苗,建立免疫屏障,可有效防止新冠病毒大規(guī)模傳染。請(qǐng)據(jù)題意并結(jié)合圖1、圖2回答下列問(wèn)題。
(1)新冠病毒是一種RNA病毒,通過(guò)其表面的S蛋白與宿主細(xì)胞膜表面ACE2受體結(jié)合而完成感染。研制疫苗時(shí),通過(guò)RT-PCR(反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))獲取S蛋白基因所需要的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶。據(jù)圖1分析,應(yīng)選擇的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ,其作用是在酶的催化下能從引物的 3'3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。
(2)PCR的產(chǎn)物一般通過(guò) 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定,結(jié)果如圖2所示。1號(hào)泳道為標(biāo)準(zhǔn)(Marker),2號(hào)泳道為陽(yáng)性對(duì)照(提純的S蛋白基因片段),3號(hào)泳道為實(shí)驗(yàn)組。標(biāo)準(zhǔn)(Marker)的實(shí)質(zhì)為不同 已知長(zhǎng)度已知長(zhǎng)度的DNA片段混合物,3號(hào)泳道若有雜帶出現(xiàn)原因一般可能是 模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);退火溫度偏低模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);退火溫度偏低(至少答出兩點(diǎn))。
(3)腺病毒是一種DNA病毒,該病毒基因組中表達(dá)出的E1區(qū)蛋白與腺病毒的復(fù)制有關(guān)而且對(duì)宿主細(xì)胞的毒性很強(qiáng)。為了提高疫苗的 安全性安全性,避免人體因重組腺病毒增殖而感染,科研中將 去除E1基因去除E1基因構(gòu)建的復(fù)制缺陷型腺病毒作為運(yùn)載S蛋白基因的載體制備新冠疫苗。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶;Ⅱ、Ⅲ;3';瓊脂糖凝膠電泳;已知長(zhǎng)度;模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);退火溫度偏低;安全性;去除E1基因
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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