反硝化細(xì)菌能在無(wú)氧環(huán)境中將硝酸鹽轉(zhuǎn)化為氮?dú)猓?NO-3+10e﹣+12H+→…→N2O→N2），在處理工業(yè)污水、治理水體富養(yǎng)化中具有重要作用?？蒲腥藛T想從一污水處理廠的活性污泥中篩選分離出耐高溫（42℃）的反硝化細(xì)菌（目的菌），用于提升溫度較高的工業(yè)污水的脫氮效率，具體流程如下：
注：BTB培養(yǎng)基初始pH=6.8，BTB是酸堿指示劑，酸性條件下為黃色，中性條件下為綠色，堿性條件為藍(lán)色。
（1）BTB培養(yǎng)基以 硝酸鹽硝酸鹽為唯一氮源，使用 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。待平板凝固后，應(yīng)倒置放在超凈臺(tái)上，目的是 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快的揮發(fā)防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快的揮發(fā)。
（2）將污泥樣品梯度稀釋后，使用 涂布器涂布器（填工具）將樣液均勻涂布在BTB培養(yǎng)基上，放在 無(wú)氧、42℃無(wú)氧、42℃環(huán)境中培養(yǎng)2-3天后，挑選顯 藍(lán)藍(lán)色的單菌落在固體培養(yǎng)基上劃線分離，獲得純菌株。
（3）將純菌株接種在液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間，若在培養(yǎng)瓶頂部檢測(cè)到N2O，即可鑒定為目的菌。不能依據(jù)培養(yǎng)液中硝酸鹽的濃度變低來(lái)鑒定目的菌，原因是 其他微生物也能利用硝酸鹽進(jìn)行代謝，硝酸鹽濃度同樣會(huì)降低其他微生物也能利用硝酸鹽進(jìn)行代謝，硝酸鹽濃度同樣會(huì)降低。
（4）為計(jì)數(shù)微生物的數(shù)量，一位同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為155、160、176、149，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為 1.6×1091.6×109。
N
O
-
3
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的數(shù)量測(cè)定．
【答案】硝酸鹽；高壓蒸汽滅菌；防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快的揮發(fā)；涂布器；無(wú)氧、42℃；藍(lán)；其他微生物也能利用硝酸鹽進(jìn)行代謝，硝酸鹽濃度同樣會(huì)降低；1.6×109
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/12/7 2:30:1組卷：24引用：3難度：0.7
相似題
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其計(jì)數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關(guān)于微生物的問(wèn)題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過(guò)程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測(cè)為真菌，則其特征中，最能說(shuō)明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)液，分別說(shuō)明原因：
①缺少，SM01不能很好生長(zhǎng)
②具有，會(huì)影響對(duì)SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測(cè)定結(jié)果
③缺乏，會(huì)影響SM01的生長(zhǎng)，也無(wú)法對(duì)阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測(cè)定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問(wèn)題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長(zhǎng)規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過(guò)增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無(wú)菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長(zhǎng)出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長(zhǎng)通SO2的時(shí)間，同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長(zhǎng)規(guī)律：在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計(jì)數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的；通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌，通常推測(cè)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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