閱讀下列材料，完成19、20題
材料：鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素等都屬于氨基糖苷類抗生素。細(xì)菌和多數(shù)線粒體的核糖體沉降系數(shù)為70S，可解離為50S和30S亞基，而真核細(xì)胞細(xì)胞所核糖體沉降系數(shù)為80S，可解離為60S和40S亞基。氨基糖苷類抗生素通過誘導(dǎo)細(xì)菌合成錯誤蛋白質(zhì)或無法合成蛋白質(zhì)等；導(dǎo)致細(xì)菌死亡。氨基糖苷類抗生素的殺菌機(jī)制主要有三種（如圖所示）：①抑制30S核糖體亞基的組裝；②抑制tRNA的5′端成熟，導(dǎo)致tRNA無法與mRNA結(jié)合；③導(dǎo)致非互補(bǔ)配對的tRNA也能夠結(jié)合于mRNA上。鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素等既可用于臨床上細(xì)菌感染的治療，也廣泛應(yīng)用于基因工程中微生物的選擇培養(yǎng)。
質(zhì)粒是基因工程中廣泛使用的載體，為獲得適宜的質(zhì)粒，對大腸桿菌的質(zhì)粒A和質(zhì)粒B進(jìn)行改造。如圖為質(zhì)粒A和質(zhì)粒B的示意圖，其中EcoR1和BumH1為限制酶識別部位；ori為復(fù)制原點；npt表示卡那霉素抗性基因，str表示鏈霉素抗性基因；gfp表示綠色熒光蛋白基因（質(zhì)粒B中不含其啟動子），其產(chǎn)物在紫外線照射下可發(fā)出綠色熒光；Pl是含有受乳糖誘導(dǎo)表達(dá)啟動子的序列；P2是通用啟動子序列。
（1）質(zhì)粒中啟動子的作用是是RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位是RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位。
（2）質(zhì)粒B作為載體時可直接作為標(biāo)記基因的是strstr。
（3）已知三個或三個以上DNA片段發(fā)生連接的幾率很小，可忽略：兩個或兩個以上質(zhì)粒難以同時進(jìn)入大腸桿菌：含有兩個或兩個以上ori的質(zhì)粒無法在大腸桿菌內(nèi)復(fù)制。為獲得可發(fā)綠色熒光的大腸桿菌。進(jìn)行以下操作：
①將含質(zhì)粒A和質(zhì)粒B的混合溶液中加入限制酶EcoR1和BamH1EcoR1和BamH1，充分反應(yīng)后加入DNA連接酶，再將產(chǎn)物導(dǎo)入大腸桿菌；
②將這些大腸桿菌涂布在含有鏈霉素鏈霉素的固體培養(yǎng)基上在適宜條件下培養(yǎng)24h,能淘汰掉部分不含綠色熒光蛋白基因的大腸桿菌菌落；
③含有目標(biāo)質(zhì)粒的大腸桿菌需要在培養(yǎng)基中加入乳糖乳糖能在紫外線照射下發(fā)出綠色熒光。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】是RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位；str；EcoR1和BamH1；鏈霉素；乳糖
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/12/12 8:0:1組卷：10引用：0難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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