新冠疫情后,病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用,回答下列問題。
(1)新冠病毒是一種RNA病毒,檢測新冠病毒RNA(核酸檢測)可以采取RT-PCR法,該過程中需要用到的酶有 逆轉錄酶、TaqDNA聚合酶逆轉錄酶、TaqDNA聚合酶。
(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準確性,在設計PCR引物時必須依據(jù)新冠病毒RNA中的來進行。據(jù)圖1分析,選擇的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ。其作用是 使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
(3)下表是SARS-CoV-2核酸檢測時PCR儀參數(shù)設定要求;
步驟 | a、病毒cDNA合成 | b、預變性 | c、變性 | d、? |
溫度 | 50℃ | 95℃ | 95℃ | 60℃ |
時間 | 15min | 5min | 5s | 40s |
循環(huán) | 1 | 1 | 45 |
保證樣本中病毒RNA均能逆轉錄形成cDNA
保證樣本中病毒RNA均能逆轉錄形成cDNA
。②步驟d的主要包括PCR過程的
復性、延伸
復性、延伸
階段。(4)PCR的產(chǎn)物一般通過電泳來鑒定,結果如圖2所示。1號泳道為標準(Marker),2號泳道為陽性對照(提純的目的基因片段),3號泳道為實驗組。標準(Marker)的實質(zhì)為不同已知長度的DNA片段混合物:3號泳道的若出現(xiàn)雜帶,原因一般有
模板受到污染;引物的特異性不強;復性溫度偏低;Mg2+濃度過高等
模板受到污染;引物的特異性不強;復性溫度偏低;Mg2+濃度過高等
(至少答出兩點)。(5)某人同時進行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測(檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體),若核酸檢測結果為陰性而抗體檢測結果為陽性,說明
曾經(jīng)感染過新冠病毒但已康復
曾經(jīng)感染過新冠病毒但已康復
(答出1種情況即可);若核酸檢測結果為陽性而抗體檢測為陰性,說明 己感染新冠病毒,還未康復
己感染新冠病毒,還未康復
。【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】逆轉錄酶、TaqDNA聚合酶;Ⅱ、Ⅲ;使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;保證樣本中病毒RNA均能逆轉錄形成cDNA;復性、延伸;模板受到污染;引物的特異性不強;復性溫度偏低;Mg2+濃度過高等;曾經(jīng)感染過新冠病毒但已康復;己感染新冠病毒,還未康復
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:2難度:0.5
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