科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實驗的主要流程如下，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復(fù)制原點的距離?？赡苡玫降南拗泼缸R別序列和切割位點如下表所示。

限制酶	BclⅠ	NotⅠ	XbaⅠ	Sau3AⅠ
識別序列及切割位點	T↓GATCA	GC↓GGCCGC	T↓CTAGA	↓GATC

（1）過程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是

DNA（半保留）復(fù)制

DNA（半保留）復(fù)制

，下列4種引物中應(yīng)選擇的是

引物a和引物b

引物a和引物b

。
引物a：5’-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3’
引物b：5’-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3’
引物c：5’-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3’
引物d：5’-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3’
（2）過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是

擴(kuò)增重組質(zhì)粒

擴(kuò)增重組質(zhì)粒

，該過程需要用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有

氨芐青霉素

氨芐青霉素

（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用限制酶Sau3AⅠ和XbaⅠ完全切割質(zhì)粒B和質(zhì)粒C后電泳，請在圖3中畫出預(yù)測的電泳結(jié)果

。
（4）科研中常用嘌呤霉素對真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，嘌呤霉素對細(xì)胞的毒性實驗結(jié)果如圖，根據(jù)實驗結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為

80μg/mL

80μg/mL

，原因是

既讓沒有抗性的細(xì)胞死亡，又不會殺死有抗性的細(xì)胞

既讓沒有抗性的細(xì)胞死亡，又不會殺死有抗性的細(xì)胞

。
（5）篩選產(chǎn)SLA-2抗原肽的豬腎上皮細(xì)胞的方法是

用抗SLA-2抗原肽的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交法篩選

用抗SLA-2抗原肽的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交法篩選

。