利用基因工程獲取人干擾素-α的方法有兩種:一是將IFN-α基因?qū)爰?xì)菌,從細(xì)胞外分離獲取;二是將IFN-α基因?qū)氘叧嘟湍妇?,結(jié)合現(xiàn)代工藝從細(xì)胞內(nèi)獲取。請回答:
(1)基因工程中構(gòu)建的表達(dá)載體一般包括 復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、啟動子序列、目的基因和終止子序列。其中標(biāo)記基因的作用是 篩選重組質(zhì)粒篩選重組質(zhì)粒,啟動子是 RNA聚合RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)。
(2)微生物代謝中合成用于自身生長發(fā)育的物質(zhì)稱為初級代謝產(chǎn)物,隨后產(chǎn)生并分泌到細(xì)胞外的生物堿、抗菌素及細(xì)菌毒素稱為次級代謝產(chǎn)物。將IFN-α基因?qū)爰?xì)胞,由于缺少細(xì)胞器 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與肽鏈的加工導(dǎo)致表達(dá)的干擾素-α無糖鏈結(jié)構(gòu);從產(chǎn)物角度分析,將該基因?qū)虢湍妇c導(dǎo)入細(xì)菌相比獲得的抗生素更純且活性更高的原因有 細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外;避免細(xì)菌毒素的副作用細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外;避免細(xì)菌毒素的副作用。(答兩點(diǎn))。
(3)畢赤酵母菌在發(fā)酵罐中具有高密度的特點(diǎn),下圖示營養(yǎng)比例及氧氣含量對酵母菌產(chǎn)干擾素-α的影響結(jié)果。
①酵母菌培養(yǎng)基中的蛋白粉被用作 氮源氮源。
②5%O2條件下,后期干擾素-α合成量急劇下降的原因可能是 酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精毒害酵母菌。制備酵母培養(yǎng)基的過程中,除了配制相關(guān)的營養(yǎng)成分外,還需要 適宜的溫度和pH適宜的溫度和pH保證酶的活性。生產(chǎn)上為節(jié)約成本,一般在發(fā)酵的后期可通過補(bǔ)充 適當(dāng)比例的碳源和氮源適當(dāng)比例的碳源和氮源并適當(dāng) 通入純凈空氣通入純凈空氣。
【答案】復(fù)制原點(diǎn);篩選重組質(zhì)粒;RNA聚合;內(nèi)質(zhì)網(wǎng);細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外;避免細(xì)菌毒素的副作用;氮源;酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精;適宜的溫度和pH;適當(dāng)比例的碳源和氮源;通入純凈空氣
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:1難度:0.5
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1.利用人胰島B細(xì)胞構(gòu)建cDNA文庫,然后通過核酸分子雜交技術(shù)從中篩選目的基因,篩選過程如圖所示。下列說法錯誤的是( ?。?br />
A.cDNA文庫的構(gòu)建需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶 B.cDNA文庫的基因數(shù)目比基因組文庫的基因數(shù)目少 C.核酸分子雜交的原理是堿基互補(bǔ)配對 D.從該文庫中可篩選到胰高血糖素基因 發(fā)布:2024/12/29 8:0:2組卷:29引用:1難度:0.7 -
2.將編碼四種不同酶的基因OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因連接,搭載到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA片段構(gòu)建多基因表達(dá)載體,最終在水稻葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新代謝途徑,提高了水稻的產(chǎn)量。下列說法錯誤的是( ?。?br />
A.可用分子雜交技術(shù)檢測四個基因是否成功導(dǎo)入水稻 B.四個基因轉(zhuǎn)錄時都以DNA的同一條單鏈為模板 C.應(yīng)選用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)化成功的水稻細(xì)胞 D.基因表達(dá)載體中的四個基因在水稻細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄 發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:22引用:2難度:0.6 -
3.基因工程利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA。限制性內(nèi)切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點(diǎn)分別如圖所示。下列分析錯誤的是( ?。?/h2>
A.構(gòu)建重組DNA時,可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體 B.構(gòu)建重組DNA時,可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體 C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后,含有兩個游離的磷酸基團(tuán) D.用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體,再用DNA連接酶連接,只能產(chǎn)生一種重組DNA 發(fā)布:2024/12/4 20:0:1組卷:43引用:4難度:0.6