由于乳酸菌難以在高密度下培養(yǎng)，研究人員將乳酸菌的乳酸脫氫酶基因（LDH）導(dǎo)入酵母菌，通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)乳酸?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR獲取LDH時(shí)所用的引物是 引物①和引物④引物①和引物④，該過程中引物的作用是 定位目的基因的位置，與模板鏈結(jié)合，作為DNA聚合酶的作用起點(diǎn)定位目的基因的位置，與模板鏈結(jié)合，作為DNA聚合酶的作用起點(diǎn)。
（2）將LDH基因插入質(zhì)粒前，用EcoRⅠ和ApaⅠ酶切質(zhì)粒和LDH，雙酶切的優(yōu)點(diǎn)是 防止目的基因（LDH）和質(zhì)粒自身環(huán)化，有利于目的基因（LDH）在質(zhì)粒上正向連接防止目的基因（LDH）和質(zhì)粒自身環(huán)化，有利于目的基因（LDH）在質(zhì)粒上正向連接，將LDH連接在質(zhì)粒上時(shí)所用的酶是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
（3）首先將LDH表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并進(jìn)行篩選，篩選時(shí)培養(yǎng)基中應(yīng)加入 氨芐青霉素氨芐青霉素。再將含有的基因表達(dá)載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中，通過電激將目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌。質(zhì)粒在酵母菌中不會(huì)隨著酵母菌繁殖而丟失的原因是 質(zhì)粒上含有真核生物復(fù)制原點(diǎn)，能在酵母菌中復(fù)制質(zhì)粒上含有真核生物復(fù)制原點(diǎn)，能在酵母菌中復(fù)制。
（4）如圖2是酵母菌發(fā)酵過程中乳酸含量的變化。在培養(yǎng)時(shí)間超過100h后，乳酸濃度不再上升的主要原因是 乳酸濃度過高導(dǎo)致PH下降，抑制酵母菌生長乳酸濃度過高導(dǎo)致PH下降，抑制酵母菌生長。為提高乳酸的生產(chǎn)效率，連續(xù)發(fā)酵時(shí)添加新培養(yǎng)基最長周期為 6060h。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物①和引物④；定位目的基因的位置，與模板鏈結(jié)合，作為DNA聚合酶的作用起點(diǎn)；防止目的基因（LDH）和質(zhì)粒自身環(huán)化，有利于目的基因（LDH）在質(zhì)粒上正向連接；T4DNA連接酶；氨芐青霉素；質(zhì)粒上含有真核生物復(fù)制原點(diǎn)，能在酵母菌中復(fù)制；乳酸濃度過高導(dǎo)致PH下降，抑制酵母菌生長；60
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：32引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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