利用轉基因奶牛乳腺生物反應器生產人的生長激素,需要構建一種能高水平表達的基因表達載體,選擇合適的基因啟動子至關重要.由于無法由基因表達產物推知啟動子的堿基序列,運用PCR技術單獨克隆啟動子存在困難.科研人員經過長期研究,終于發(fā)明了下圖所示的一種克隆啟動子的方法.請分析回答:
(1)培育轉基因奶牛時,需要在生長激素基因編碼序列前插入乳腺蛋白基因乳腺蛋白基因的啟動子;構建的基因表達載體導入動物受精卵常用顯微注射顯微注射技術.
(2)由基因表達產物無法推知啟動子堿基序列,其原因是基因中啟動子的堿基序列不能被轉錄基因中啟動子的堿基序列不能被轉錄.
(3)過程①需選擇的限制酶是BamHⅠBamHⅠ,過程③需選擇的限制酶是HindⅢHindⅢ.過程④需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶).
(4)過程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設計引物引物進行擴增.運用PCR擴增DNA片段的原理是DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制.
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】乳腺蛋白基因;顯微注射;基因中啟動子的堿基序列不能被轉錄;BamHⅠ;HindⅢ;熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);引物;DNA雙鏈復制
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:45引用:3難度:0.9
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2.Golden Gate是當代極為重要的一種分子克隆技術,該技術的實施依賴于Ⅱs型限制酶,如圖所示為某種Ⅱs型限制酶的識別序列和切割位點(N表示任意堿基),以下說法正確的是( ?。?br />
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