雙層平板法（如圖）是對噬菌體進(jìn)行檢測、計(jì)數(shù)的常用方法，該方法的操作流程為：倒底層平板→倒上層平板→培養(yǎng)→觀察→計(jì)數(shù)?；卮鹣铝袉栴}：
（1）底層平板是含2%瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，制備該培養(yǎng)基的一般步驟為：計(jì)算→稱量→溶化→（調(diào)pH）滅菌（調(diào)pH）滅菌→倒平板；培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至 中性或微堿性中性或微堿性。某同學(xué)制作的底層平板凹凸不平，可能的原因是 溫度過低導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固溫度過低導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固。
（2）倒上層平板時(shí)，先將含1%瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基滅菌，再冷卻至45～48℃，然后加入細(xì)菌和待測噬菌體稀釋懸液的混合液，充分混勻后迅速倒在底層平板上，隨即旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿。將培養(yǎng)基冷卻至45～48℃最主要的原因是 避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿的目的是 使混合液分布均勻，確保平板平整使混合液分布均勻，確保平板平整。
（3）培養(yǎng)一段時(shí)間后，在上層平板上可以看見一些如圖所示的空斑即噬菌斑，出現(xiàn)空斑的原因是 噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡。稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)噬菌斑來自原液中的一個(gè)噬菌體，根據(jù)噬菌斑數(shù)目和 稀釋倍數(shù)、使用稀釋懸液的體積稀釋倍數(shù)、使用稀釋懸液的體積就可推算出待測樣液中噬菌體的數(shù)量。統(tǒng)計(jì)的噬菌斑數(shù)往往比噬菌體的實(shí)際數(shù)目低，可能的原因是 一個(gè)噬菌斑可能由兩個(gè)或多個(gè)噬菌體侵染而成；兩個(gè)或多個(gè)噬菌斑重疊成一個(gè)一個(gè)噬菌斑可能由兩個(gè)或多個(gè)噬菌體侵染而成；兩個(gè)或多個(gè)噬菌斑重疊成一個(gè)。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；培養(yǎng)基的配制．
【答案】（調(diào)pH）滅菌；中性或微堿性；溫度過低導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固；避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體；使混合液分布均勻，確保平板平整；噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡；稀釋倍數(shù)、使用稀釋懸液的體積；一個(gè)噬菌斑可能由兩個(gè)或多個(gè)噬菌體侵染而成；兩個(gè)或多個(gè)噬菌斑重疊成一個(gè)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/8/9 8:0:9組卷：42引用：3難度：0.5
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1．致病菌與抗生素。
結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的傳染病。 結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁厚脂質(zhì)含量高，能抵御不利自然環(huán)境，在干痰中可存活 6-8 個(gè)月，若黏附于塵埃上可保持傳染性 8-10 天。人體被感染后結(jié)核分枝桿菌可侵犯全身各組織器官，但以肺部感染最多。
（1）結(jié)核病的傳播途徑主要是。
A、空氣傳播 B、接觸傳播 C、媒介物傳播 D、病媒傳播
（2）根據(jù)病原菌在體內(nèi)的感染部位，推測結(jié)核分枝桿菌的代謝方式是。
A、異養(yǎng)厭氧型 B、自養(yǎng)厭氧型 C、自養(yǎng)好氧型 D、異養(yǎng)好氧型
為探究不同抗生素對結(jié)核分枝桿菌的抑菌效果，研究者從患者體內(nèi)提取的病原菌進(jìn)行分離培養(yǎng)。 培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基主要含有天門冬氨酸、甘油、雞蛋黃、KH2PO4、MgSO4等。
（3）此培養(yǎng)基成分中既能作為氮源同時(shí)提供生長因子的是。
將分離得到的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行增殖培養(yǎng)后，取細(xì)菌培養(yǎng)液 2 滴涂布于固體培養(yǎng)基上，然后將浸有相同濃度不同種類的抗生素圓紙片置于培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng) 4 周，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1．其中圓紙片 A、B 分別浸過抗生素 A 和抗生素 B，圓紙片 C 浸過抗生素 A、B 的混合物。圖2是細(xì)菌結(jié)構(gòu)示意圖，圖中箭頭表示不同抗生素的作用位置。
（4）欲得到如圖1實(shí)驗(yàn)結(jié)果，接種過程用到的實(shí)驗(yàn)器材有（多選）。
（5）實(shí)驗(yàn)中圓紙片 D 用作實(shí)驗(yàn)對照，對圓紙片D的處理方法是。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說明圓紙片周圍清晰區(qū)大小與抗生素抑菌效果的關(guān)系：，并從抗生素對細(xì)菌產(chǎn)生的作用解釋圓紙片C周圍清晰區(qū)大于圓紙片A和B的原因。發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：33引用：1難度：0.6 -
2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，需經(jīng)細(xì)菌的分解才能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細(xì)菌的有關(guān)問題，請分析回答：
（1）上圖是利用法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種分散逐步到培養(yǎng)基的表面．除此方法外，常用的微生物接種方法還有（寫一種）．
（2）如果要對培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對接種環(huán)進(jìn)行，灼燒的接種環(huán)冷卻后才能接種的原因是．
（3）下面是兩種培養(yǎng)基的配方：表1：A培養(yǎng)基配方
表2：B培養(yǎng)基配方KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4?7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 1 000mL
①配制培養(yǎng)基的操作步驟纖維素粉 NaNO3 Na2HPO4?7H2O KH2PO4 MgSO4?7H2O KCl 酵母浸膏 H2O 5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 1 000mL （用字母順序回答）．
a.倒平板 b.計(jì)算 c.溶化 d.稱量 e.滅菌
②通常培養(yǎng)基采用法滅菌，在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，應(yīng)將平板倒置，目的是．
③如果要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)選擇上述（A、B）配方的培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中加入指示劑，可初步鑒定出該種細(xì)菌能否分解尿素．
④據(jù)B培養(yǎng)基的成分，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是．
（4）尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它們能合成．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：13引用：2難度：0.5 -
3．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能很好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，某生物興趣小組同學(xué)試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能把尿素高效降解為氨的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟乳下圖所示．請分析回答問題．
（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4?7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 尿素 1g 瓊脂 15g 將上述物質(zhì)溶解后，
用自來水定容到1 000mL，理由是．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選，這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的和．
（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）下列材料或用具中：
①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管
③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手
需要滅菌的是：；需要消毒的是：．（填序號）
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)果后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行處理后，才能倒掉．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：11引用：1難度：0.5
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