科學(xué)家將綠色熒光蛋白(GFP)基因轉(zhuǎn)入小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)內(nèi),GFP基因若表達(dá)就會使細(xì)胞帶有綠色熒光,繼而利用帶有綠色熒光的ES細(xì)胞培育出嵌合型的小鼠用于科學(xué)研究,流程如圖所示。請回答:
(1)在步驟①中構(gòu)建基因表達(dá)載體時,需要在GFP基因的首端加入RNA聚合RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動GFP基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得GFP.GFP基因的尾端還需有終止子終止子,使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止下來。
(2)步驟②的受體細(xì)胞是小鼠ES細(xì)胞,ES細(xì)胞一般從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離得到,且ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯的特點(diǎn)。在培養(yǎng)ES細(xì)胞時,細(xì)胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂,這種現(xiàn)象稱為接觸抑制接觸抑制。如果想繼續(xù)培養(yǎng)則需要重新用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為傳代傳代培養(yǎng)。
(3)圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測是否有綠色熒光細(xì)胞,再通過胚胎移植胚胎移植技術(shù)移入代孕母鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。
【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植;干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用.
【答案】RNA聚合;終止子;內(nèi)細(xì)胞團(tuán);體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯;接觸抑制;胰蛋白酶(或膠原蛋白酶);傳代;胚胎移植
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:14引用:2難度:0.7
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