人的血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對(duì)血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑,其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為HSA基因兩側(cè)的核苷酸序列。圖三為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
(1)基因工程的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建,完成過(guò)程②所需要技術(shù)手段是 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。
(2)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因,根據(jù)其兩端序列,則需要設(shè)計(jì)的引物序列是 引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′。
(3)依據(jù)圖一、圖二和圖三分析,成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到 22個(gè)DNA片段。
(4)圖一過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓 T-DNAT-DNA整合到植物細(xì)胞染色體DNA上,除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含 物質(zhì)K物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
(5)過(guò)程④前對(duì)卵細(xì)胞供體母牛進(jìn)行 超數(shù)排卵超數(shù)排卵處理。過(guò)程通常將受精卵培養(yǎng)至 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚階段。過(guò)程⑤鑒定胚胎性別時(shí)常取 滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析。
(6)為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況,可提取受體細(xì)胞的 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì),用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。
【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建;植物組織培養(yǎng);引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′;2;農(nóng)桿菌;T-DNA;物質(zhì)K;超數(shù)排卵;桑葚胚或囊胚;滋養(yǎng)層;蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:2難度:0.6
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發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
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(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
(2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
(3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程
(4)⑤過(guò)程需要用到發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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