人感染乳頭瘤病毒（HPV）可誘發(fā)宮頸癌等惡性腫瘤，人乳頭瘤病毒疫苗可以預(yù)防由HPV引起的多種宮頸癌，是世界上第一個(gè)預(yù)防癌癥的疫苗。圖a是HPV疫苗制備所需的L1基因片段，圖b是某種質(zhì)粒載體。

回答下列問(wèn)題：
（1）為構(gòu)建重組HPV疫苗，科研人員將L1基因插入質(zhì)粒中，最好選擇限制酶

BamHI、HindⅢ

BamHI、HindⅢ

進(jìn)行共同切割，原因是

不會(huì)導(dǎo)致標(biāo)記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點(diǎn)不唯一，導(dǎo)致結(jié)果不可控

不會(huì)導(dǎo)致標(biāo)記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點(diǎn)不唯一，導(dǎo)致結(jié)果不可控

（答出2點(diǎn)即可）。
（2）圖中啟動(dòng)子為RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)，該處序列應(yīng)根據(jù)

大腸桿菌

大腸桿菌

（填“人宮頸細(xì)胞”或“乳頭瘤病毒”或“大腸桿菌”）的RNA聚合酶識(shí)別序列來(lái)設(shè)計(jì)。
（3）若將工具酶處理目的基因和質(zhì)粒載體得到的混合物經(jīng)過(guò)連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的含有質(zhì)粒載體，有的含帶有目的基因的重組質(zhì)粒。如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述三種大腸桿菌中，能夠正常生長(zhǎng)的有

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌

，這些大腸桿菌能正常生長(zhǎng)的原因是

二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)

二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)

﹔若將上述篩選出來(lái)的大腸桿菌，培養(yǎng)在含有卡那霉素的固體培養(yǎng)基上，其生長(zhǎng)情況可能是

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌能正常生長(zhǎng)，而含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能生長(zhǎng)

含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌能正常生長(zhǎng)，而含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能生長(zhǎng)

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（4）導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)物衣殼蛋白L1經(jīng)純化，可被免疫系統(tǒng)識(shí)別，引起免疫反應(yīng)。與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，這樣的重組疫苗更安全又有效。從疫苗的組成成分分析，其主要原因是

衣殼蛋白L1無(wú)核酸成分，無(wú)繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細(xì)胞，而傳統(tǒng)滅活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

衣殼蛋白L1無(wú)核酸成分，無(wú)繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細(xì)胞，而傳統(tǒng)滅活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

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