有資料表明胃癌細胞中有胃泌素相關(guān)基因的表達,而且外源性胃泌素對胃癌細胞有明顯促進生長的作用。某科研人員為驗證外源性胃泌素的上述作用,以及進一步研究丙谷胺對其作用的影響,進行了以下實驗研究。請完善實驗思路,并根據(jù)實驗結(jié)果進行分析。
(要求與說明:用細胞流式測定儀測定細胞周期分布;實驗結(jié)果測定的具體操作不作要求;培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液變化忽略不計;實驗條件適宜)
(1)完善實驗思路:
①將X型胃癌細胞培養(yǎng)3天后制備細胞懸液備用。用細胞培養(yǎng)液配制適宜濃度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取適量等量細胞懸液加入4組培養(yǎng)瓶中待繼續(xù)培養(yǎng),每組若干,各組處理如下。
甲組:50uL胃泌素+50uL細胞培養(yǎng)液50uL胃泌素+50uL細胞培養(yǎng)液;
乙組:50μL丙谷胺溶液+50uL細胞培養(yǎng)液;
丙組:50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液;
丁組:100μL細胞培養(yǎng)液。
③將上述樣品在適宜條件下進行培養(yǎng)。48h后取部分樣品測定細胞周期分布細胞周期分布,并記錄。
④72h后取剩余樣品在570nm波長測定OD值72h后取剩余樣品在570nm波長測定OD值,并記錄。
⑤對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,結(jié)果如下。
表:胃泌素和丙谷胺對X型胃癌細胞增殖及細胞周期的影響
組別 | 72h,570nm | 48h,各時期細胞百分比(%) | ||
OD值 | G1 | S | G2+M | |
甲 | 0.767±0.025 | 55.60 | 25.20 | 19.20 |
乙 | 0.559±0.020 | 70.10 | 20.05 | 9.85 |
丙 | 0.585±0.022 | 68.60 | 21.10 | 10.30 |
丁 | 0.561±0.026 | 70.00 | 20.00 | 10.00 |
(2)實驗分析與討論:
甲組與丁組數(shù)據(jù)比較,說明甲組的處理最可能是促進了S期細胞的
DNA復(fù)制
DNA復(fù)制
,從而促進腫瘤細胞增殖。乙、丁組數(shù)據(jù)幾乎沒有差異,但甲、丙組數(shù)據(jù)差異明顯,可見丙谷胺具有抑制外源性胃泌素
抑制外源性胃泌素
作用。【答案】50uL胃泌素+50uL細胞培養(yǎng)液;50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液;細胞周期分布;72h后取剩余樣品在570nm波長測定OD值;DNA復(fù)制;抑制外源性胃泌素
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:4難度:0.7
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2.細胞周期包括分裂間期(分為G1期、S期和G2期)和分裂期(M期)。如圖標注了甲動物(體細胞染色體數(shù)為12)腸上皮細胞的細胞周期各階段的時長及DNA含量,請回答下列問題:
(1)若用含放射性同位素的胸苷(DNA復(fù)制的原料之一)短期培養(yǎng)甲動物腸上皮細胞后,處于S期的細胞都會被標記。洗脫含放射性同位素的胸苷,換用無放射性的新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng),定期檢測。預(yù)計最快約
(2)從被標記的M期細胞開始出現(xiàn)到其所占M期細胞總數(shù)的比例達到最大值并開始減少時,所經(jīng)歷的時間為
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