動物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能?,F(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種研究工作中,特別是新發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù),為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑:“S途徑”和“D途徑”,B淋巴細(xì)胞有“S途徑”和“D途徑”;骨髓瘤細(xì)胞只有“D途徑”;HAT培養(yǎng)基中氨基蝶呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。如圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1)動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是制備單克隆抗體的基礎(chǔ)。
(2)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是 特異性強、靈敏度高,并可大量制備特異性強、靈敏度高,并可大量制備。
(3)雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的 在體外大量增殖(無限增殖)在體外大量增殖(無限增殖)特點,又具備淋巴細(xì)胞的 分泌特異性抗體分泌特異性抗體特點。
(4)圖示用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞的過程中,融合的淋巴細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)在HAT培養(yǎng)基上不生長的原因是 缺乏在體外培養(yǎng)基中增殖的能力缺乏在體外培養(yǎng)基中增殖的能力,融合的骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不生長的原因是 其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進行DNA復(fù)制其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進行DNA復(fù)制。
(5)若在體外大規(guī)模培養(yǎng)該雜交瘤細(xì)胞,需要采取一定的措施保證被培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中,如向培養(yǎng)液中加一定量的 抗生素抗生素,及時更換培養(yǎng)液等;為保證足夠的營養(yǎng),通常需加入 動物血清動物血清等一些天然成分,還需提供一定濃度的 CO2CO2,以維持培養(yǎng)液適宜的pH。若是將動物組織分解成單個細(xì)胞形成細(xì)胞懸液,還需要用 胰蛋白酶或膠原蛋白胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動物細(xì)胞融合;動物細(xì)胞培養(yǎng);特異性強、靈敏度高,并可大量制備;在體外大量增殖(無限增殖);分泌特異性抗體;缺乏在體外培養(yǎng)基中增殖的能力;其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進行DNA復(fù)制;抗生素;動物血清;CO2;胰蛋白酶或膠原蛋白
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:16引用:1難度:0.7
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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