R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA,可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列(3'-UTR)結(jié)合,進而影響基因的表達。為研究R-7是否影響家蠶基因B(調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育)的表達,科研人員將基因B中對應(yīng)3'-UTR的DNA片段與熒光素酶基因(R-7不影響熒光素酶基因的表達)重組后導(dǎo)入家蠶胚胎細胞觀察其表達結(jié)果。請回答下列問題:
(1)利用 PCRPCR技術(shù)擴增基因B中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段,應(yīng)先依據(jù)的 該基因的一段核苷酸序列該基因的一段核苷酸序列合成引物。若對一個含基因B的DNA擴增n代,則共需消耗 2n-12n-1對引物。
(2)圖甲所示重組載體中的熒光素酶基因在基因工程中作為 標(biāo)記基因標(biāo)記基因;對應(yīng)3'-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點 22,原因是 目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因。
(3)科研人員分別從實驗組和對照組細胞中提取蛋白質(zhì),經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值(在適宜條件下,熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光),其結(jié)果如圖乙所示。
①實驗組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細胞中,對照組1的處理為將含有熒光素酶基因的表達載體(不含對應(yīng)3′-UTR的DNA片段)導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細胞中,則對照組2的處理應(yīng)為 將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R—7的家蠶胚胎細胞中將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R—7的家蠶胚胎細胞中。
②依據(jù)結(jié)果,得出實驗結(jié)論:R一7抑制基因B的表達R一7抑制基因B的表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】PCR;該基因的一段核苷酸序列;2n-1;標(biāo)記基因;2;目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因;將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R—7的家蠶胚胎細胞中;R一7抑制基因B的表達
【解答】
【點評】
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