采礦污染和不當使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進行后續(xù)處理（例如，收集植物組織器官異地妥善儲存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd 轉(zhuǎn)運蛋白（YCF1）（其基因序列內(nèi)含有1個↓GATC一序列）基因?qū)胧茉嚄顦?，并檢測了相關(guān)指標?；卮鹣铝袉栴}：
（1）通過生物信息學(xué)分離得到的YCF1基因可通過PCR進行擴增，擴增過程中DNA聚合酶具有 熱穩(wěn)定性熱穩(wěn)定性的特點，某次PCR擴增產(chǎn)物電泳結(jié)果顯示：實驗組和對照組都沒有任何條帶，從引物角度分析可能的原因有 引物特異性差引物特異性差。
（2）利用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用 BclⅠ和SmaⅠBclⅠ和SmaⅠ酶切割質(zhì)粒，酶切后的載體和目的基因片段，通過 DNA連接DNA連接酶作用后獲得重組質(zhì)粒。轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的受體菌，在分別含有四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基中的生長情況分別為 存活、死亡存活、死亡，從平板上長出的菌落中提取質(zhì)粒利用Sau3AⅠ進行酶切，最多可以得到 33種大小不同的DNA片段。
| 限制酶 | BamHⅠ | XmaⅠ | BclⅠ | SmaⅠ | Sau3AⅠ |
| 識別序列及切割位點 | -G↓GATCC- | -C↓CCGGG- | -T↓GATCA- | -CCC↓GGG- | -↓GATC- |
重組載體
重組載體
導(dǎo)入大腸桿菌。研究者進一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的雄性不育楊樹株系，采用不育株系作為實驗材料的目的是 避免目的基因在自然界中的擴散
避免目的基因在自然界中的擴散
。【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】熱穩(wěn)定性；引物特異性差；BclⅠ和SmaⅠ；DNA連接；存活、死亡；3；重組載體；避免目的基因在自然界中的擴散
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/1 8:0:9組卷：2引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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