當(dāng)?shù)貢r間2022年1月7日,馬里蘭大學(xué)醫(yī)學(xué)院團(tuán)隊(duì)表示對一名患有晚期心臟病的57歲男子實(shí)施了全球首例豬心臟移植手術(shù)。事實(shí)上,這顆豬心臟并非完全是傳統(tǒng)意義上的豬的心臟,而是經(jīng)過了基因編輯的心臟。馬里蘭大學(xué)醫(yī)學(xué)中心表示,他們在供體豬中進(jìn)行了10個獨(dú)特的基因編輯——敲掉了3個會引發(fā)免疫排斥反應(yīng)的豬的基因和1個會導(dǎo)致心臟組織過度生長的豬的基因,并插入了6個來自人類的基因。用重組DNA技術(shù)可以賦予豬新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品?;卮鹣铝袉栴}:
(1)在此過程中需要使用多種工具酶,其中4種限制酶的切割位點(diǎn)如圖所示:
常用的DNA連接酶有E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中 EcoRI或PstⅠEcoRI或PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E?coliDNA連接酶連接。上圖中 EcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRVEcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRV酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(2)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征,如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn),可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能 自我復(fù)制自我復(fù)制;質(zhì)粒DNA分子上有 限制酶切割位點(diǎn)限制酶切割位點(diǎn),便于外源DNA插入;質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因,如某種抗生素抗性基因,利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞,方法是 將待篩選的宿主細(xì)胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中,能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞將待篩選的宿主細(xì)胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中,能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。
(3)如果要在短時間內(nèi)獲得較多的目的基因,通常采用 PCRPCR技術(shù),該技術(shù)的原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制。在操作步驟中需要加熱至90~95℃使 含目的基因的DNA受熱變性,從而解鏈為單鏈含目的基因的DNA受熱變性,從而解鏈為單鏈,然后降溫至55~65℃,其目的是 使引物和模板鏈結(jié)合使引物和模板鏈結(jié)合。
(4)如果檢測發(fā)現(xiàn)目的基因隨質(zhì)粒被成功導(dǎo)入了受體細(xì)胞,但卻沒有檢測到目的基因相對應(yīng)的蛋白質(zhì),應(yīng)考慮位于目的基因首端的 啟動子啟動子和末端的 終止子終止子是否設(shè)計(jì)好,并從這方面進(jìn)行改善。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】EcoRI或PstⅠ;EcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRV;磷酸二酯鍵;自我復(fù)制;限制酶切割位點(diǎn);將待篩選的宿主細(xì)胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中,能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞;PCR;DNA半保留復(fù)制;含目的基因的DNA受熱變性,從而解鏈為單鏈;使引物和模板鏈結(jié)合;啟動子;終止子
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:7引用:1難度:0.5
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
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3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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