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Cre-loxP系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特定基因的敲除,其技術(shù)過(guò)程如圖1所示??茖W(xué)家把幾種熒光蛋白基因和cre酶能識(shí)別并切制的序列(loxP1和loxP2)串在一起,構(gòu)建如圖2所示的表達(dá)載體T,在Cre酶的幫助下,一部分熒光蛋白基因會(huì)被隨機(jī)地“剪掉”,而剩下的部分得以表達(dá),這樣就可以隨機(jī)呈現(xiàn)不同的顏色。這種利用熒光蛋白“點(diǎn)亮”神經(jīng)元的大腦成像技術(shù)被稱為“腦彩虹”,能幫助科學(xué)家了解大腦。
(1)用PCR同時(shí)擴(kuò)增這三種熒光蛋白基因,擴(kuò)增完第四輪會(huì)消耗試劑盒中的引物
48
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個(gè),引物的作用是
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸
。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)應(yīng)先用
限制酶
限制酶
分別切割目的基因和載體。構(gòu)建成功后常用顯微注射法將表達(dá)載體T導(dǎo)入小鼠受精卵中,獲得細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠a(不含Cre酶)。小鼠a的腦組織細(xì)胞和其他組織細(xì)胞的色彩分別是
紅色
紅色
無(wú)色
無(wú)色
。
(2)已知兩個(gè)loxP1之間或兩個(gè)loxP2之間的基因,最多會(huì)被Cre酶敲除一次。研究者將Cre酶基因與病毒基因重組構(gòu)建Cre病毒,然后將Cre病毒注入小鼠A體內(nèi),出現(xiàn)“腦彩虹”現(xiàn)象,小鼠A的一個(gè)腦細(xì)胞的色彩為
紅色或黃色或藍(lán)色
紅色或黃色或藍(lán)色

(3)利用上述技術(shù)可以培育能夠在一個(gè)細(xì)胞內(nèi)隨機(jī)出現(xiàn)兩種顏色的“腦彩虹”小鼠,請(qǐng)依據(jù)題目信息,簡(jiǎn)要寫(xiě)出設(shè)計(jì)思路
設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成
設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成
。

【答案】48;使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸;限制酶;紅色;無(wú)色;紅色或黃色或藍(lán)色;設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.科學(xué)家為了提高光合作用過(guò)程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)??衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個(gè)引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     

    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。梢垣@得多個(gè)具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
  • 2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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