人體中α-2a基因表達(dá)的干擾素(α-2a)具有抗癌和抗病毒的能力??茖W(xué)家們采用基因工程技術(shù)將α-2a基因?qū)氪竽c桿菌進(jìn)行干擾素生產(chǎn)。圖甲、乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
請(qǐng)據(jù)圖分析回答:
(1)利用PCR技術(shù)將α-2a基因擴(kuò)增n代,共需 2n-12n-1對(duì)引物參與子代DNA分子的合成,該過(guò)程中需使用 耐高溫的DNA聚合耐高溫的DNA聚合酶。在該酶的作用下,從引物的 3'3'端延伸子鏈。
(2)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,最好選用 HindIII和BamHIHindIII和BamHI限制酶切割處理質(zhì)粒、外源 DNA以防止質(zhì)粒和外源DNA發(fā)生自身環(huán)化;構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),用 DNA連接(E.coliDNA連接或T4DNA連接)DNA連接(E.coliDNA連接或T4DNA連接)酶催化目的基因與質(zhì)粒間形成 磷酸二酯磷酸二酯鍵。
(3)干擾素(α-2a)體外保存相當(dāng)困難,如果將其分子上的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸,就可在-70℃的條件下保存半年。這一目的已經(jīng)通過(guò) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程實(shí)現(xiàn)了,該工程的直接操作對(duì)象是 基因基因。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】2n-1;耐高溫的DNA聚合;3';HindIII和BamHI;DNA連接(E.coliDNA連接或T4DNA連接);磷酸二酯;蛋白質(zhì);基因
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/8/5 8:0:8組卷:3引用:2難度:0.5
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發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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