人血清白蛋白(HSA)是血漿蛋白的主要成分,具有維持血漿滲透壓和進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸?shù)墓δ堋@没蚬こ躺a(chǎn)重組人血清白蛋白(rHSA)可解決HSA短缺問題??蒲腥藛T依據(jù)基因組中HSA基因的堿基序列,同時考慮生產(chǎn)菌X(一種組氨酸缺陷型酵母菌)的生理特點(diǎn),人工設(shè)計(jì)了rHSA基因。如圖為基因工程所用質(zhì)粒及相關(guān)元件。請回答下列問題:
(1)rHSA基因與HSA基因的堿基序列不完全相同,但編碼的氨基酸序列相同,原因是 密碼子具有簡并性,不同的密碼子(堿基序列)可以編碼相同的氨基酸密碼子具有簡并性,不同的密碼子(堿基序列)可以編碼相同的氨基酸。
(2)S基因合成的信號肽能引導(dǎo)后續(xù)合成的肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔,將rHSA基因構(gòu)建在S基因后形成融合基因,優(yōu)點(diǎn)是 可以讓rHSA具有信號肽,有利于其進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中進(jìn)行加工可以讓rHSA具有信號肽,有利于其進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中進(jìn)行加工。
(3)rHSA基因?qū)肷a(chǎn)菌X需要經(jīng)過兩次篩選:第一次在含有的培養(yǎng)基中篩選得到含rHSA基因表達(dá)載體的大腸桿菌;第二次篩選時,將上述大腸桿菌與生產(chǎn)菌X混合,然后在的基本培養(yǎng)基上培養(yǎng),可在此培養(yǎng)基上生長的生產(chǎn)菌X含有rHSA基因表達(dá)載體。rHSA基因表達(dá)載體既可在大腸桿菌中又可在生產(chǎn)菌X中穩(wěn)定遺傳的原因是 該基因表達(dá)載體上既有原核生物復(fù)制原點(diǎn),又有真核生物復(fù)制原點(diǎn)該基因表達(dá)載體上既有原核生物復(fù)制原點(diǎn),又有真核生物復(fù)制原點(diǎn)。
(4)AOX1為甲醇氧化酶的啟動子,以其作為rHSA基因的啟動子時,在以甲醇為碳源的培養(yǎng)基中rHSA基因正常表達(dá),無甲醇時該基因不表達(dá)。從生產(chǎn)控制的角度分析,選用AOX1作為rHSA基因的啟動子的優(yōu)點(diǎn)是 可以通過控制培養(yǎng)液中甲醇的有無來控制rHSA基因的表達(dá)可以通過控制培養(yǎng)液中甲醇的有無來控制rHSA基因的表達(dá)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】密碼子具有簡并性,不同的密碼子(堿基序列)可以編碼相同的氨基酸;可以讓rHSA具有信號肽,有利于其進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中進(jìn)行加工;該基因表達(dá)載體上既有原核生物復(fù)制原點(diǎn),又有真核生物復(fù)制原點(diǎn);可以通過控制培養(yǎng)液中甲醇的有無來控制rHSA基因的表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評】
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