枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶在醫(yī)藥和化工等領(lǐng)域具有重要的價值。為篩選蛋白酶產(chǎn)量高的枯草芽孢桿菌菌株，分別將浸過不同菌株的提取液（a-e）及無菌水（f）的無菌圓紙片置于平板培養(yǎng)基表面，在37℃恒溫箱中放置2-3天，結(jié)果如圖1．請回答問題：

（1）在篩選枯草芽孢桿菌蛋白酶高產(chǎn)菌株時，培養(yǎng)基營養(yǎng)成分應(yīng)包括水、無機鹽、生長因子、葡萄糖、

蛋白質(zhì)（酪蛋白）

蛋白質(zhì)（酪蛋白）

。培養(yǎng)枯草芽孢桿菌時，常用搖床進行振蕩培養(yǎng)，目的是

增加培養(yǎng)液中的溶氧量并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，有利于目的菌的生長繁殖

增加培養(yǎng)液中的溶氧量并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，有利于目的菌的生長繁殖

。
（2）a-e中蛋白酶產(chǎn)量最高的菌株是

a

a

（用字母回答），判斷依據(jù)是

a周圍的透明圈最大，說明其產(chǎn)生的蛋白酶數(shù)量多或活性高

a周圍的透明圈最大，說明其產(chǎn)生的蛋白酶數(shù)量多或活性高

。
（3）利用凝膠色譜法分離提取到的部分蛋白質(zhì)時，等樣品完全進入凝膠層后，加入pH為7.0、濃度為20mmol/L的

磷酸緩沖液

磷酸緩沖液

到適當(dāng)高度進行洗脫，結(jié)果先洗脫出來的是

相對分子質(zhì)量較大

相對分子質(zhì)量較大

的蛋白質(zhì)。
（4）質(zhì)監(jiān)局為了檢驗標(biāo)有含該蛋白酶的加酶洗衣粉質(zhì)量，設(shè)計了如圖2所示實驗。如果實驗結(jié)果是

A組膠片上的蛋白膜消失，B組膠片上的蛋白膜未消失

A組膠片上的蛋白膜消失，B組膠片上的蛋白膜未消失

，則說明該洗衣粉中含有蛋白酶。若用該實驗來判斷此酶活性大小可通過觀察

膠片上的蛋白膜消失所需時間的長短（相同時間內(nèi)蛋白膜消失的面積）

膠片上的蛋白膜消失所需時間的長短（相同時間內(nèi)蛋白膜消失的面積）

實現(xiàn)。