甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌，研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇?nbsp;并成功表達?；卮鹣铝袉栴}。
（1）獲取目的基因是實施基因工程的第一步，獲取目的基因的方法有 從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取、人工合成人工合成（答出兩種）。
（2）要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達，需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞，原因是 目的基因無表達所需的啟動子目的基因無表達所需的啟動子和 目的基因無復(fù)制原點目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在目的基因無復(fù)制原點目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在。
（3）甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外，但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少，這一特點的優(yōu)點在于 便于目的蛋白的分離和純化便于目的蛋白的分離和純化，甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同，從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析，其原因可能是 甲醉酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體甲醉酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。
（4）在構(gòu)建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒，使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端，其目的是 防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】從基因文庫中獲取；人工合成；目的基因無表達所需的啟動子；目的基因無復(fù)制原點目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在；便于目的蛋白的分離和純化；甲醉酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體；防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.7
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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