因牛奶中的乳糖,有些人食用牛奶后會出現(xiàn)不適癥狀。為了解決這個問題,科學家將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M,使該轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低,而其他營養(yǎng)成分不受影響。生物興趣小組想結(jié)合所學知識設計相關培育流程,請幫助他們解決下列問題。
(1)運用PCR技術擴增腸乳糖酶基因,所用的原料有 dATP、dTTP、dCTP、dGTPdATP、dTTP、dCTP、dGTP。
(2)圖a中三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列與切割位點,圖b為某種質(zhì)粒的示意圖(質(zhì)粒上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的)。
經(jīng)BamHⅠ酶切得到的目的基因可以與上述質(zhì)粒被 sau3AIsau3AI酶切后的產(chǎn)物連接,理由是 兩種限制酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端兩種限制酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端。腸乳糖酶基因必須插入到圖b質(zhì)粒中啟動子終止子之間的目的是 使腸乳糖酶基因能夠正常轉(zhuǎn)錄使腸乳糖酶基因能夠正常轉(zhuǎn)錄。
(3)一般采用 顯微注射儀顯微注射儀(填儀器名稱)將含有腸乳糖酶基因的表達載體導入受精卵。
(4)將導入腸乳糖酶基因的受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中進行培養(yǎng),其中培養(yǎng)液成分除一些無機鹽和有機鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及 血清血清等物質(zhì)。
(5)當胚胎發(fā)育到適宜階段時,進行胚胎移植。移植能否成功,主要與 受體的生理狀況受體的生理狀況有關。
(6)應用胚胎分割技術,可以提高胚胎的利用率。其中在對囊胚階段的胚胎進行分割時,要注意將內(nèi)細胞團 均等均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】dATP、dTTP、dCTP、dGTP;sau3AI;兩種限制酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端;使腸乳糖酶基因能夠正常轉(zhuǎn)錄;顯微注射儀;血清;受體的生理狀況;均等
【解答】
【點評】
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