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新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測,方法是取檢測者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增(過程如圖1所示),同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來檢測PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測過程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈”熒光信號的強(qiáng)度也等比例增加,可通過熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖1。

(1)“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中應(yīng)該含有:檢測者mRNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針、
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
、
dNTP
dNTP
、緩沖體系。
(2)PCR擴(kuò)增過程中,加入引物的作用是
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。
(3)理論上,在檢測過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測結(jié)果呈
(填“陰”或“陽”)性,但為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過閾值時(shí)才確診?,F(xiàn)有甲、乙兩個(gè)待檢樣本,檢測時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線(圖2),但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確)
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。

(4)接種疫苗是預(yù)防新冠肺炎最好途徑之一,陳薇院士團(tuán)隊(duì)研發(fā)的腺病毒載體重組疫苗,早已二期臨床試驗(yàn)。圖3是腺病毒載體新冠疫苗(Ad5-nCoV)工作機(jī)理示意圖。

新冠病毒S蛋白基因表達(dá)產(chǎn)物S蛋白進(jìn)入人體后,作為
抗原
抗原
,Ad5腺病毒載體是較為成熟的平臺(tái),是將腺病毒中負(fù)責(zé)復(fù)制的基因片段用
限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
剪切掉,被稱作復(fù)制缺陷型腺病毒載體。用改造過的復(fù)制缺陷型腺病毒作為載體,可防止
病毒自身復(fù)制
病毒自身復(fù)制
使宿主細(xì)胞裂解死亡。
(5)目前接種的疫苗,除腺病毒載體重組疫苗外,還有基因工程疫苗,兩種疫苗的技術(shù)路線如下表。與基因工程疫苗相比,腺病毒載體重組疫苗的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在
持續(xù)表達(dá)抗原,免疫應(yīng)答更持久
持續(xù)表達(dá)抗原,免疫應(yīng)答更持久
。缺點(diǎn)是腺病毒載體本身可能會(huì)降低新冠疫苗的作用。
方法 技術(shù)路線
腺病毒載體組疫苗 S蛋白基因→腺病毒基因表達(dá)載體→人體
基因工程疫苗 S蛋白基因→基因表達(dá)載體→大腸桿菌→S蛋白→人體

【答案】熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);dNTP;使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;陽;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;抗原;限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶);病毒自身復(fù)制;持續(xù)表達(dá)抗原,免疫應(yīng)答更持久
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:2難度:0.6
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  • 1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
  • 2.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題:
    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)。可利用定點(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個(gè)引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     
    。
    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克隆),可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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