新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測,方法是取檢測者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增(過程如圖1所示),同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來檢測PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測過程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈”熒光信號的強(qiáng)度也等比例增加,可通過熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖1。
(1)“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中應(yīng)該含有:檢測者mRNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)、dNTPdNTP、緩沖體系。
(2)PCR擴(kuò)增過程中,加入引物的作用是 使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
(3)理論上,在檢測過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測結(jié)果呈 陽陽(填“陰”或“陽”)性,但為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過閾值時(shí)才確診?,F(xiàn)有甲、乙兩個(gè)待檢樣本,檢測時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線(圖2),但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確) 甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少。
(4)接種疫苗是預(yù)防新冠肺炎最好途徑之一,陳薇院士團(tuán)隊(duì)研發(fā)的腺病毒載體重組疫苗,早已二期臨床試驗(yàn)。圖3是腺病毒載體新冠疫苗(Ad5-nCoV)工作機(jī)理示意圖。
新冠病毒S蛋白基因表達(dá)產(chǎn)物S蛋白進(jìn)入人體后,作為 抗原抗原,Ad5腺病毒載體是較為成熟的平臺(tái),是將腺病毒中負(fù)責(zé)復(fù)制的基因片段用 限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)剪切掉,被稱作復(fù)制缺陷型腺病毒載體。用改造過的復(fù)制缺陷型腺病毒作為載體,可防止 病毒自身復(fù)制病毒自身復(fù)制使宿主細(xì)胞裂解死亡。
(5)目前接種的疫苗,除腺病毒載體重組疫苗外,還有基因工程疫苗,兩種疫苗的技術(shù)路線如下表。與基因工程疫苗相比,腺病毒載體重組疫苗的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在 持續(xù)表達(dá)抗原,免疫應(yīng)答更持久持續(xù)表達(dá)抗原,免疫應(yīng)答更持久。缺點(diǎn)是腺病毒載體本身可能會(huì)降低新冠疫苗的作用。
方法 | 技術(shù)路線 |
腺病毒載體組疫苗 | S蛋白基因→腺病毒基因表達(dá)載體→人體 |
基因工程疫苗 | S蛋白基因→基因表達(dá)載體→大腸桿菌→S蛋白→人體 |
【答案】熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);dNTP;使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;陽;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;抗原;限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶);病毒自身復(fù)制;持續(xù)表達(dá)抗原,免疫應(yīng)答更持久
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:2難度:0.6
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