紅色熒光蛋白(mScarlet)在細胞內蛋白質的定位和動態(tài)示蹤等方面有著廣泛的應用。研究人員欲構建mScarlet蛋白表達載體,將其轉入擬南芥的細胞中表達。回答下列問題:
(1)要擴增mScarlet基因時,需要先設計一對與mScarlet基因兩端序列互補配對的引物。為方便構建重組質粒,在引物中需要增加適當?shù)?限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶位點。設計引物時,研究人員需要避免引物之間形成 堿基互補配對堿基互補配對而導致引物自連。
(2)質粒作為基因表達的載體,應具備的基本條件有 具有標記基因,能自我復制具有標記基因,能自我復制(答出2點)。除此需要具有啟動子和終止子,啟動子的作用是 驅動目的基因轉錄出mRNA驅動目的基因轉錄出mRNA。
(3)構建含mScarlet基因的表達載體還需要使用DNA連接酶,該酶催化形成的化學鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。常見的DNA連接酶中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制性核酸內切酶;堿基互補配對;具有標記基因,能自我復制;驅動目的基因轉錄出mRNA;磷酸二酯鍵;T4DNA連接酶
【解答】
【點評】
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