如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線.圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn).
據(jù)圖回答:
(1)獲得人乳鐵蛋白基因的目前常用方法有從基因組文庫(kù)中獲取目的基因從基因組文庫(kù)中獲取目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因和根據(jù)已知蛋白質(zhì)中的氨基酸序列推知基因的脫氧核苷酸序列再進(jìn)行化學(xué)合成.
(2)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因.篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行.
(3)人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)時(shí)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是啟動(dòng)子啟動(dòng)子,其合成的產(chǎn)物是人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA(添具體內(nèi)容).
(4)為檢測(cè)?;蚪M中是否含有人乳鐵蛋白基因可采用DNA分子雜交DNA分子雜交技術(shù)
(5)①過程的受體若是雙子葉植物和裸子植物,則采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因組文庫(kù)中獲取目的基因;HindⅢ和BamHⅠ;氨芐青霉素;啟動(dòng)子;人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA;DNA分子雜交;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:2難度:0.5
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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