第一代DNA測序技術(shù)是由桑格等科學(xué)家發(fā)明的，又稱為鏈終止法測序，科學(xué)家用該技術(shù)測定了噬菌體X174的基因組序列，操作流程如圖所示，回答下列問題：
（1）將碎片化的DNA片段連接到質(zhì)粒載體中，需要用到 限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶DNA連接酶等工具酶。
（2）為保證放射自顯影觀察條帶，應(yīng)選用 32P32P（填“18O”或“32P”）標記ddNTP。
（3）在凝膠電泳中DNA分子的遷移速率與DNA分子的 DNA分子的大小和構(gòu)象DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度凝膠的濃度有關(guān)。
（4）ddNTP法循環(huán)測序中，用到PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA的半保留復(fù)制DNA的半保留復(fù)制，加入ddNTP會使PCR反應(yīng)終止的原因可能是 連接到子鏈末端的ddNTP不能再與其它脫氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯鍵，導(dǎo)致ddNTP一旦連接到子鏈末端，子鏈便停止延伸連接到子鏈末端的ddNTP不能再與其它脫氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯鍵，導(dǎo)致ddNTP一旦連接到子鏈末端，子鏈便停止延伸。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】限制性內(nèi)切酶；DNA連接酶；32P；DNA分子的大小和構(gòu)象；凝膠的濃度；DNA的半保留復(fù)制；連接到子鏈末端的ddNTP不能再與其它脫氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯鍵，導(dǎo)致ddNTP一旦連接到子鏈末端，子鏈便停止延伸
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?，?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克?。梢垣@得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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