大芻草具有較強(qiáng)的耐鹽堿能力，該性狀與M蛋白有關(guān)?？茖W(xué)家通過PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增M蛋白基因（如圖1）。將獲得的大量M蛋白基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，各部分結(jié)構(gòu)如圖2所示。
（1）PCR一般可分為變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸三步。據(jù)圖1分析，PCR過程應(yīng)選擇的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ，引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。
（2）在M蛋白基因兩端設(shè)計不同黏性末端的目的是 防止M蛋白基因自身環(huán)化，保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接防止M蛋白基因自身環(huán)化，保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接。質(zhì)粒中氨芐青霉素抗性基因的作用是 便于重組DNA分子的篩選便于重組DNA分子的篩選。
（3）為實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒和M蛋白基因的高效連接，切割質(zhì)粒時選用限制酶XmaⅠ而不選用限制酶SmaⅠ的原因是 XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端為平末端，無法與M蛋白基因的黏性末端連接XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端為平末端，無法與M蛋白基因的黏性末端連接。為將M蛋白基因連接到質(zhì)粒上，還需要等酶 BglⅡ、DNA連接酶BglⅡ、DNA連接酶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】變性、復(fù)性、延伸；Ⅱ、Ⅲ；使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；防止M蛋白基因自身環(huán)化，保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接；便于重組DNA分子的篩選；XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端為平末端，無法與M蛋白基因的黏性末端連接；BglⅡ、DNA連接酶
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.4
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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