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利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白,近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1是基因工程常用的一種質(zhì)粒;圖2是利用該質(zhì)粒構(gòu)建的一種基因表達載體。各限制酶質(zhì)粒上分別只有一處識別序列,將質(zhì)粒和重組質(zhì)粒用相應(yīng)的限制酶酶切后,得到的DNA片段長度如表中數(shù)據(jù)。請回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
質(zhì)粒 重組質(zhì)粒
BglⅡ 6.0kb 7.1kb
ClaⅠ 6.0kb 2.3kb,4.8kb
PstⅠ 6.0kb 1.5kb,5.6kb
(1)在基因工程中作為載體的質(zhì)粒應(yīng)具備的基本條件有
在受體細胞中能自我復制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復制)、具有標記基因、有一個至多個限制酶切割位點
在受體細胞中能自我復制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復制)、具有標記基因、有一個至多個限制酶切割位點
,而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有
啟動子和終止子
啟動子和終止子
。
(2)為了獲得更多的目的基因,可用PCR擴增,PCR的原理是
DNA的半保留復制
DNA的半保留復制
。PCR反應(yīng)體系中加入dNTP后,這些物質(zhì)既可以作為
原料
原料
,也可以為反應(yīng)提供
能量
能量
。
(3)PCR中通常會得到不同的DNA產(chǎn)物,常采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
法鑒定,不同DNA片段因
相對分子質(zhì)量、所帶電荷
相對分子質(zhì)量、所帶電荷
等不同,在電場中的遷移速率也不同,因而可以形成不同條帶。
(4)已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb,則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為
1.6
1.6
kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb(如圖1所示),結(jié)合圖2分析,目的基因上ClaⅠ、PstⅠ兩種限制酶的切割位點分別為
a和b
a和b
(在a、b兩點中選填)。
(5)培養(yǎng)受體菌時,在培養(yǎng)基中應(yīng)加入適量的
氨芐青霉素
氨芐青霉素
,可以將導入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都篩選出來。

【答案】在受體細胞中能自我復制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復制)、具有標記基因、有一個至多個限制酶切割位點;啟動子和終止子;DNA的半保留復制;原料;能量;瓊脂糖凝膠電泳;相對分子質(zhì)量、所帶電荷;1.6;a和b;氨芐青霉素
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/12/14 19:30:1組卷:23引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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