α1-抗胰蛋白酶是肝臟細胞合成的一種糖蛋白,人體缺乏α1-抗胰蛋白酶會導(dǎo)致肺氣腫。科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)成功培育出轉(zhuǎn)基因羊,培育過程如圖所示。這種轉(zhuǎn)基因羊進入泌乳期后,其乳汁中含有人類的α1-抗胰蛋白酶,分離、提取羊乳中的α1-抗胰蛋白酶可用于治療肺氣腫?;卮鹣铝袉栴}:
(1)獲取α1-抗胰蛋白酶基因的mRNA后,通常采用 反轉(zhuǎn)錄(RT—PCR)反轉(zhuǎn)錄(RT—PCR)法獲取α1-抗胰蛋白酶基因,與基因組文庫中的基因相比,該方法獲取的目的基因在結(jié)構(gòu)上的特點是 沒有內(nèi)含子、啟動子和終止子等序列沒有內(nèi)含子、啟動子和終止子等序列。
(2)利用PCR技術(shù)可對目的基因進行擴增,若α1-抗胰蛋白酶基因的堿基序列(部分片段)如下所示,則需要構(gòu)建的引物序列分別為 5'GACCTGTGGAAGC3'5'GACCTGTGGAAGC3'、5'CAATCCCGTATG3'5'CAATCCCGTATG3'。
5′GACCTGTGGAAGC……CATACGGGATTG3′
3′CTGGACACCTTCG……GTATGCCCTAAC5′
(3)選擇品種優(yōu)良,健康的母羊,對母羊用 促性腺激素促性腺激素處理,使其排出更多卵子,再用電刺激等方法取出公羊的精子,采用 培養(yǎng)法或化學(xué)誘導(dǎo)法培養(yǎng)法或化學(xué)誘導(dǎo)法等方法對精子進行獲能處理,最后在受精溶液中完成受精過程。
(4)與其他體細胞相比,受精卵是導(dǎo)入基因表達載體的最佳受體細胞,原因是 受精卵大,易操作;全能性最高(最容易發(fā)育成胚胎和個體)受精卵大,易操作;全能性最高(最容易發(fā)育成胚胎和個體)。對培養(yǎng)的早期胚胎進行性別鑒定后,可在桑葚胚或囊胚期進行胚胎移植,胚胎移植的本質(zhì)是 早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。
【考點】體外受精和胚胎移植.
【答案】反轉(zhuǎn)錄(RT—PCR);沒有內(nèi)含子、啟動子和終止子等序列;5'GACCTGTGGAAGC3';5'CAATCCCGTATG3';促性腺激素;培養(yǎng)法或化學(xué)誘導(dǎo)法;受精卵大,易操作;全能性最高(最容易發(fā)育成胚胎和個體);早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移
【解答】
【點評】
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