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基因工程可以賦予生物新的性狀,科研人員利用基因工程技術(shù)以期待獲得具備抗旱特性的小麥。
限制酶 識(shí)別序列
BamHⅠ 5’GGATCC
SacⅠ 5’GAGCTC
HindⅢ 5’AAGCTT
XbaⅠ 5’TCTAGA
(1)研究發(fā)現(xiàn)某些植物的種子脫水?dāng)?shù)十年后復(fù)水仍能夠恢復(fù)活性,原因是細(xì)胞中積累了海藻糖。科研人員擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。如圖標(biāo)注了載體、TPS基因的酶切位點(diǎn)(表格列舉了限制酶的識(shí)別序列)和預(yù)期的基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)??蒲腥藛T利用PCR技術(shù)獲得大量的TPS基因。PCR技術(shù)中引物的設(shè)計(jì)至關(guān)重要,其作用是使DNA聚合酶能夠從引物的
3'
3'
端開始連接脫氧核苷酸。為了方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,需要在引物的一端設(shè)計(jì)
BamHⅠ和ScaⅠ
BamHⅠ和ScaⅠ
的識(shí)別序列,則設(shè)計(jì)的引物序列為
②④
②④
。(填數(shù)字)(①~④中加粗表示識(shí)別序列前的保護(hù)序列,增強(qiáng)限制酶與目的基因的結(jié)合。)
①5'-CCCGGATCCCTTAGCTTGCTAATCGTTGA-3'
②5'-CCCGGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT-3'
③5'-CCGAAGCTTAGCCTAACGTACAAGTTCGT-3'
④5'-CCGGAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT-3'
(2)圖中Bar基因是抗除草劑基因?;虮磉_(dá)載體轉(zhuǎn)入細(xì)胞后,在獲得的植株葉片上涂抹除草劑,篩選出7株抗除草劑個(gè)體。Bar基因作為載體上的
標(biāo)記
標(biāo)記
基因輔助篩選TPS轉(zhuǎn)基因植株。
(3)現(xiàn)對(duì)篩選出的抗除草劑個(gè)體進(jìn)行DNA水平的檢測(cè)。請(qǐng)?zhí)顚懕砀?,完成?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):
組別 植株編號(hào)1-7 對(duì)照組1 對(duì)照組2
模板
(提取的)1-7號(hào)植株DNA
(提取的)1-7號(hào)植株DNA
基因表達(dá)載體或TPS基因
基因表達(dá)載體或TPS基因
空載體
PCR體系中其他物質(zhì)
緩沖液
緩沖液
(添加Mg2+)、水、引物、
4種脫氧核苷酸
4種脫氧核苷酸
、
熱穩(wěn)定的DNA聚合酶
熱穩(wěn)定的DNA聚合酶
電泳預(yù)期結(jié)果 有條帶 有條帶
無(wú)條帶
無(wú)條帶

【答案】3';BamHⅠ和ScaⅠ;②④;標(biāo)記;(提取的)1-7號(hào)植株DNA;基因表達(dá)載體或TPS基因;緩沖液;4種脫氧核苷酸;熱穩(wěn)定的DNA聚合酶;無(wú)條帶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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