隨著全球轉(zhuǎn)基因作物大規(guī)模種植和全球一體化下頻繁的貿(mào)易流通，轉(zhuǎn)基因監(jiān)管的任務(wù)將越來越重。為了還給消費(fèi)者知情權(quán)和選擇權(quán)，多個(gè)國(guó)家和地區(qū)對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品實(shí)行標(biāo)識(shí)管理制度，這些法規(guī)實(shí)施的前提就是要建立穩(wěn)定、準(zhǔn)確的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)。PCR轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)以其特異性強(qiáng)、快速和準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)被多國(guó)檢測(cè)工作者使用，該技術(shù)通常包括核酸提取、核酸擴(kuò)增、擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)3個(gè)步驟。某研究小組設(shè)計(jì)并完成了“轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆定性PCR檢測(cè)”實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)參與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并回答相關(guān)問題（草甘膦為常用除草劑；轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆的外源基因構(gòu)建圖如圖1所示）：
（1）提取DNA：取待測(cè)大豆組織裂解破碎，進(jìn)行DNA提取和純化，得到待測(cè)大豆基因組DNA。該過程的常用的試劑有EDTA、SDS、NaCl、酒精等。在研磨液中加入NaCl的目的是 溶解DNA溶解DNA；純化DNA時(shí)可使用酒精，是因?yàn)?（某些）蛋白質(zhì)等有機(jī)物溶于酒精溶液（酒精能去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)），DNA不溶于酒精溶液（某些）蛋白質(zhì)等有機(jī)物溶于酒精溶液（酒精能去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)），DNA不溶于酒精溶液。
（2）DNA擴(kuò)增：
①在確定擴(kuò)增對(duì)象后，從 序列數(shù)據(jù)庫(kù)序列數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得待擴(kuò)增基因序列，以此為依據(jù)可設(shè)計(jì)引物。該小組擬定的引物設(shè)計(jì)如表所示，其引物設(shè)計(jì)有一個(gè)是不科學(xué)的，請(qǐng)指出并說明原因 CaMV35S的引物設(shè)計(jì)不科學(xué)，原因是引物太短、特異性弱，并且兩個(gè)引物之間會(huì)互補(bǔ)結(jié)合CaMV35S的引物設(shè)計(jì)不科學(xué)，原因是引物太短、特異性弱，并且兩個(gè)引物之間會(huì)互補(bǔ)結(jié)合。
| 基因 | 引物序列 | 產(chǎn)物片段大小 | 基因來源 |
| Lectin | F-5'GCC CTC TAC TCC ACC CCC ATC C-3' R-5'GCC CAT CTG CAA GCC TTT TTG TG-3' |
118 | 內(nèi)源基因 |
| CaMV35S | F-5'GGG ATT-3' R-5'AAT CCC-3' |
195 | 外源基因 |
| NOS | F-5'GAA TCC TGT TGC CGG TCT TG-3' R-5'TTA TCC TAG TTT GCG CGC TA-3' |
180 | 外源基因 |
| CP4-EPSPS | F-5'CTT CTG TGC TGT AGC CAC TGA TGC-3 R-5'CCA CTA TCC TTC GCA AGA CCC TTC C-3 |
320 | 外源基因 |
②PCR擴(kuò)增：在4個(gè)反應(yīng)體系中分別加入
待測(cè)大豆基因組DNA
待測(cè)大豆基因組DNA
（模板）、相應(yīng)引物、Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合）
Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合）
酶、4種脫氧核苷酸等，并將PCR儀的溫度設(shè)定為：變性94℃30s、復(fù)性58℃30s、延伸72℃40s,循環(huán)30次?！把由臁钡臏囟仍O(shè)定為72℃，是因?yàn)樵摐囟认?Taq酶活性較高
Taq酶活性較高
。在設(shè)定的PCR體系下可以特異性擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段，主要是因?yàn)?引物與模板DNA的結(jié)合
引物與模板DNA的結(jié)合
具有特異性。（3）擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)：可采用
瓊脂糖凝膠電泳（電泳）
瓊脂糖凝膠電泳（電泳）
的方法。部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2、3所示。據(jù)圖2初步判斷，該大豆為 非轉(zhuǎn)基因
非轉(zhuǎn)基因
（填“轉(zhuǎn)基因”或“非轉(zhuǎn)基因”）大豆。據(jù)圖2、圖3分析，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果是 不可信的
不可信的
（填“可信的”或“不可信的”）。
注：M：標(biāo)準(zhǔn)參照物，1：陽性對(duì)照（基因標(biāo)準(zhǔn)品），2：陰性對(duì)照（普通大豆），3：核酸提取空白對(duì)照，4：待鑒定樣本。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】溶解DNA；（某些）蛋白質(zhì)等有機(jī)物溶于酒精溶液（酒精能去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)），DNA不溶于酒精溶液；序列數(shù)據(jù)庫(kù)；CaMV35S的引物設(shè)計(jì)不科學(xué)，原因是引物太短、特異性弱，并且兩個(gè)引物之間會(huì)互補(bǔ)結(jié)合；待測(cè)大豆基因組DNA；Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合）；Taq酶活性較高；引物與模板DNA的結(jié)合；瓊脂糖凝膠電泳（電泳）；非轉(zhuǎn)基因；不可信的
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.7
相似題
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1．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個(gè)引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。梢垣@得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7