黃萎病是危害棉花種植的常見疾病,其病原菌主要為大麗輪枝菌和黑白輪枝菌??茖W家通過基因工程技術將抗黃萎病基因D導入棉花,獲得抗黃萎病棉花。圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因,BclⅠ、HindⅢ和BamHⅠ為限制酶。請回答下列問題:
(1)獲得堿基序列未知的基因D的方法一般為 從DNA文庫中獲取從DNA文庫中獲取。利用PCR技術擴增基因D時,設計引物序列的主要依據(jù)是 與D基因兩端的部分核苷酸序列堿基互補配對與D基因兩端的部分核苷酸序列堿基互補配對。
(2)將目的基因D和Ti質粒連接構建重組質粒時,切割Ti質粒應選用的限制酶是 HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ,原因是 雙酶切產(chǎn)生不同的黏性末端,防止自身環(huán)化和倒接,保證了目的基因準確插入到T-DNA內(nèi)部雙酶切產(chǎn)生不同的黏性末端,防止自身環(huán)化和倒接,保證了目的基因準確插入到T-DNA內(nèi)部;可利用含 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基對導入重組質粒的農(nóng)桿菌進行篩選。
(3)農(nóng)桿菌能夠感染棉花的愈傷組織細胞,與這些細胞可以分泌大量的 酚類化合物酚類化合物有關。種植抗黃萎病棉花在環(huán)境保護方面的意義主要表現(xiàn)在 減少化學農(nóng)藥的用量,減少環(huán)境污染和對人類的危害,對保護環(huán)境有益減少化學農(nóng)藥的用量,減少環(huán)境污染和對人類的危害,對保護環(huán)境有益。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從DNA文庫中獲?。慌cD基因兩端的部分核苷酸序列堿基互補配對;HindⅢ和BamHⅠ;雙酶切產(chǎn)生不同的黏性末端,防止自身環(huán)化和倒接,保證了目的基因準確插入到T-DNA內(nèi)部;氨芐青霉素;酚類化合物;減少化學農(nóng)藥的用量,減少環(huán)境污染和對人類的危害,對保護環(huán)境有益
【解答】
【點評】
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