超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的獲得與鑒定
在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中,所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示,P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖2所示。
回答下列問題:
(1)強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,能被RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結(jié)合,驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá),應(yīng)優(yōu)先選用BamHI和SacIBamHI和SacI酶組合,將片段和Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。
(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入潮霉素潮霉素進(jìn)行篩選,篩選出的愈傷組織(再)分化(再)分化形成叢芽,最終獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米株系。
(3)據(jù)圖2分析,選擇a1、a2、a3玉米株系,作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究的實(shí)驗(yàn)材料,理由是a1、a2、a3玉米株系的P蛋白表達(dá)量顯著高于野生型玉米a1、a2、a3玉米株系的P蛋白表達(dá)量顯著高于野生型玉米。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合酶;BamHI和SacI;將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上;潮霉素;(再)分化;a1、a2、a3玉米株系的P蛋白表達(dá)量顯著高于野生型玉米
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:57引用:3難度:0.7
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